舞毒蛾性信息素结合蛋白和嗅觉受体OrCo的功能研究

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舞毒蛾Lymantria dispar (Linnaeus)是全球森林生态系统最具危害性的森林害虫类群之一,具有十分突出的检疫重要性。该害虫大量爆发时,植物叶片常被食光,严重影响林木生长,甚至导致树木死亡。舞毒蛾在寻找寄主、配偶以及取食等过程中,嗅觉和味觉在虫体同外界化学信息交流过程中起着重要的作用。因此,对其成虫嗅觉系统的深入研究就是控制其为害的一个突破点。研究气味受体的特性、变异及专一性对于阐明嗅觉识别的分子机理是非常重要的。本研究首先利用RT-PCR (reverse transcription polymerase chain reaction)和RACE (rapid-amplification of cDNA ends)技术获得了舞毒蛾非典型受体蛋白OrCo (coreceptor)基因,并对其进行序列分析,验证正确性之后采用RNAi技术成功沉默了舞毒蛾嗅觉受体基因orco和目前已知的性信息素结合蛋白(Pheromone binding protein, PBP)基因pbp1、pbp2。现将主要研究结果总结如下:(1)成功克隆舞毒蛾Lymantria dispar (Linnaeus)的OrCo气味受体基因,并分析了其序列特征,验证了基因序列的正确性,为进一步研究舞毒蛾气味受体的功能,OrCo基因的进化以及揭秘嗅觉机制奠定基础,同时也可以为害虫生物防治提供新的途径和方法。(2)利用RNAi技术沉默了舞毒蛾嗅觉受体基因orco以及性信息素结合蛋白基因pbp1和pbp2,然后采用电生理实验和Real-time PCR实验检测并验证基因沉默效果。结果显示这三个基因表达的缺失严重影响了舞毒蛾对性信息素的识别,初步验证了舞毒蛾orco基因所行使的功能与前人研究的其它昆虫的同类基因非常相似,并且发现这三个基因在功能上体现出相互促进的效果,说明气味分子进入舞毒蛾嗅觉感器进行信号传导的过程与前人研究的其它昆虫的传导过程相似,但就其具体的传导机制仍需做进一步的研究。这为利用RNAi技术防控舞毒蛾提供了重要依据,也为进一步研究舞毒蛾相关基因的功能提供了特异、高效、快速、简便的技术手段。
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