农杆菌介导苹果转化AtGAI基因的研究

来源 :中国农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:laiqu8710
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
果树转基因中存在的问题除了转基因沉默和外源基因不能在果树生命周期中稳定表达外,一个重要的限制因子是转化效率低,植株再生困难。为了优化苹果离体再生体系与遗传转化体系,提高果树基因转化效率,以‘宫藤’富士苹果为试材,对其离体再生体系和农杆菌介导的遗传转化体系进行了研究。试验结果表明:以‘宫藤’富士苹果茎段为外植体,分别在初代培养基(MS+1.0 mg/L6-BA+100 mg/L.抗坏血酸)、继代培养基(MS+1.0 mg/L6-BA+0.01 mg/L NAA)、生根诱导培养基(1/2 MS+1.0 mg/LIBA)、生根培养基(1/2 MS)进行初代培养、继代培养、生根诱导培养和生根培养基可以获得‘宫藤’富士苹果再生植株:以‘宫藤’富士苹果组培苗叶片为外植体,在MS+5.0 mg/L6-BA+1.0 mg/L NAA培养基上可以得到最高的再生效率,为73.3%,且叶片近轴面接触培养基对叶片再生的效果好于远轴面接触培养基。采用根癌农杆菌介导法将拟南芥赤霉素信号传导负调节因子AtGAI基因转入‘宫藤’富士苹果组织,经过抗生素筛选获得抗性愈伤,分化获得再生植株,通过PCR、PCR-Southern检测,证明.AtGAI基因转入‘宫藤’富士苹果细胞中,得到转基因植株共计13株,平均转化率为3.7%。
其他文献