胶束转运与荧光探针两种体外模型分析豆腐消化肽抑制胆固醇转运吸收作用

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研究证实,大豆蛋白具有降血脂功效,但其降血脂机理尚未完全明晰。本文建立胶束转运和荧光探针两种模型来验证豆腐酶解物的降胆固醇活性。选用两种已被证明具有降胆固醇活性的豆腐--内酯豆腐和老豆腐作为研究对象,运用体外胃肠道消化模型,从而获得分子量(M_R)不同的豆腐酶解物,然后在高效液相-蒸发光散射检测器(HPLC-ELSD)方法验证产物的胶束胆固醇转运抑制作用基础上探究了胶束转运和荧光探针两种模型的检测效果。采用凝胶层析和动态光散射仪(DLS)来分析人工胶束模型中微粒的构成以及分布,并通过添加不同浓度的豆腐酶解物来观察抑制胆固醇转运效果。实验结果证实,豆腐经体外模拟消化后的酶解产物具有降胆固醇活性,且不同M_R酶解物抑制活性不同。其中>10k HHT抑制胶束胆固醇转运活性最强,胆固醇胶束吸收率为(55.34±0.03)%。胶束转运模型中存在两种微粒——磷脂囊泡和混合胶粒,这两种颗粒都不同程度的参与了胶束胆固醇转运,并且两者在不同的酶解物浓度下有着不同的抑制效果。荧光探针模型中成功合成荧光探针(DChol)且提纯率达到了90%,也通过直观的荧光特性进一步验证了豆腐酶解物的降胆固醇活性。总之,胶束转运及荧光探针两种模型均可以用于分析检测豆腐酶解物抑制胆固醇转运吸收作用。
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