罗汉果甜苷提取、纯化及脂溶性结构类似物合成

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罗汉果甜苷是我国药食同源植物罗汉果的主要活性成分之一,具有广泛的生理功能,包括镇咳,抗炎,抗氧化,降血糖,保肝,抗癌,增强免疫力等。罗汉果甜苷V作为含量最多的甜苷,是一种新型的保健型功能甜味剂,应用十分广泛。目前对罗汉果甜苷苷元成分即罗汉果醇糖基化化学修饰的研究较少,罗汉果醇的苯甲酰基糖基化修饰可以作为合成具有甜度的脂溶性化合物的一种有效手段。主要研究工作如下:首先对罗汉果进行了基本成分含量的测定,结果如下:水分含量为8.75±0.22%,灰分为3.55±0.07%,脂肪含量为5.26±0.14%,粗多糖含量为29.69±0.09%,蛋白质含量较少为0.13±0.27%,本文研究的主要成分罗汉果甜苷含量为3.47±0.16%。探讨了料液比、乙醇浓度、超声时间、超声温度对超声波辅助提取罗汉果甜苷的影响,通过单因素和正交试验优化提取工艺,得到最优条件为:超声温度55℃,超声时间45 min,料液比1:45(g/mL),乙醇浓度60%,在此工艺条件下罗汉果甜苷得率达到 2.98±0.10%。通过对大孔吸附树脂的研究,对罗汉果甜苷的初步纯化进行了优化,结果为选用D101大孔吸附树脂,上样量为2 BV,样液pH=9.0,洗脱液乙醇浓度60%,用量2 BV,纯化后收率为63.3%,经HPLC检测,其中罗汉果甜苷V的含量达到66.8%。然后硅胶柱层析进一步精制罗汉果总甜苷的主要成分罗汉果甜苷V,经HPLC检测,得到纯化后的样品纯度为99.8%,收率40.7%。对纯化后的罗汉果甜苷V进行了薄层色谱分析,应用红外光谱及核磁共振对其进行了结构表征,验证其结构与文献报道相一致。最后,通过糖苷化法,以罗汉果苷元--罗汉果醇、葡萄糖和半乳糖为原料,经过苯甲酰基保护单糖分子、1位羟基溴代、糖苷化三步反应最终制得了两种脂溶性较好的罗汉果糖苷类结构类似物:罗汉果醇-β-D-2,3,4,6-四-O-苯甲酰基葡萄糖吡喃苷、罗汉果醇-β-D-2,3,4,6-四-O-苯甲酰基半乳糖吡喃苷,收率分别是52.3%和54.0%。对化合物的结构利用薄层色谱、比旋光度、质谱、核磁分析相关技术进行表征,证实两种化合物均为新化合物。并对两种产物进行了初步的甜度分析,结果表明二者均带有甜味,罗汉果醇苯甲酰化葡萄糖苷的甜度比半乳糖苷稍甜。
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