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本试验旨在研究饲喂高低比例棉籽壳饲粮对多浪羊瘤胃菌群结构、反刍行为、瘤胃发酵参数、纤维素酶及营养物质表观消化率的影响。旨在为反刍动物粗饲料的高效利用和提高棉籽壳饲料的利用率提供了科学依据。试验设计为饲养试验,试验预饲期为30 d,正饲期30d。通过分析饲喂高低比例棉籽壳饲粮对两组多浪羊的反刍行为、营养物质表观消化率、ADG、瘤胃发酵参数及瘤胃微生物菌群结构的数据进行整合比较分析,进而揭示多浪羊对高比例棉籽壳饲粮适应性机制。具体试验结果分为以下四个部分:试验一:饲喂高低比例棉籽壳饲粮对多浪羊反刍行为的影响本试验通过研究饲喂高低比例棉籽壳饲粮对多浪羊反刍行为的影响,探究多浪羊对高比例棉籽壳饲粮的适应性,为提高棉籽壳饲粮利用率提供科学数据。试验选取20只健康良好安装永久性瘤胃瘘管的多浪羊羯羊,并按体重（28±2.2 kg）的相近的原则均匀地分为两组,高比例棉籽壳例组（H）和低比例棉籽壳组（L）,棉籽壳比例分别为58%（H）,20%（L）。试验预饲期为30 d,在正饲期的第13～15 d采用人工观察并使用计时器记录试验羊的反刍行为。结果表明:饲喂高比例棉籽壳饲粮能够显著增加多浪羊的反刍时长和夜间反刍次数（P＜0.05）,总反刍次数有增加趋势但差异不显著（P＞0.05）。饲喂高比例棉籽壳饲粮不影响多浪羊的昼夜节律和反刍规律变化,H组与L组多浪羊的反刍行为主要集中在夜间进行,H组与L组的夜间反刍时长均高于昼间反刍时长,总反刍时长中夜间反刍占比分别为63.97%（H）、60.24%（L）;日间反刍占比分别为36.03%（H）、39.76%（L）。H组和L组多浪羊单位小时内的反刍时长表现出相似的变化规律。在饲喂后H组与L组均表现为单位小时内反刍时长均表现为先下降后上升,在晨饲（9:00）后单位小时内反刍时长先下降后上升,在晨饲5 h后降至最低,8 h后达到反刍高峰;在下午饲喂（21:00）后1 h后降至最低,9 h后达到反刍高峰,且在全天大部分时间段内H组多浪羊单位小时内的反刍时长均高于L组。试验二:饲喂高低比例棉籽壳饲粮对多浪羊瘤胃发酵参数及纤维素酶活性的影响本试验设计与分组同试验一。在正饲期的第9～11 d,连续3 d分别于晨饲后的0、2、4、6和8 h分别采集每只羊的瘤胃内液50 m L,用于测定多浪羊瘤胃p H、氨态氮（NH3-N）浓度及挥发性脂肪酸（VFA）浓度的动态变化;在正饲期的第20 d于晨饲前采集瘤胃内容物,用于纤维素酶活性测定。结果表明:晨饲后多浪羊瘤胃p H呈现先下降后上升的变化趋势,在晨饲2 h后降至最低值,在晨饲8 h后达到最高值,且在不同时段内H组p H值均高于L组,且在0 h和2 h存在显著差异（P＜0.05）。晨饲后多浪羊瘤胃NH3-N浓度均呈先下降后上升的变化趋势,在晨饲后瘤胃NH3-N浓度逐渐降低,H组与L组分别在晨饲后4、6 h降至最低,而后缓慢回升。在不同时段内H组NH3-N浓度均低于L组,且在晨饲后0、2、4和8 h时存在极显著差异（P＜0.01）,晨饲后6 h时存在显著差异（P＜0.05）。晨饲后H组与L组乙酸、丙酸、丁酸、戊酸、总挥发性脂肪酸均呈先上升后下降的变化趋势。在晨饲后0 h时H组乙酸浓度显著低于L组（P＜0.05）,2 h时H组乙酸浓度极显著低于L组（P＜0.01）,H组在不同时间段内的丙酸浓度均低于L组,且在晨饲后2 h时差异显著（P＜0.05）;在晨饲后0 h、4 h、6 h、8 h时H组的丁酸浓度高于L组,2 h时丁酸浓度低于H组;H组在不同时间段的戊酸浓度均低于L组,在晨饲后0、4和6 h时H组戊酸浓度显著低于L组（P＜0.05）;H组在不同时间段的的总挥发性脂肪酸浓度均低于L组,且在0～2 h时差异显著（P＜0.05）。饲喂高比例棉籽壳饲粮会使多浪羊瘤胃内羧甲基纤维素酶活性显著增高（P＜0.05）。试验三:饲喂高低比例棉籽壳饲粮对多浪羊表观消化率的影响本试验设计与分组同试验一。在正饲期的1～8 d采用全收粪法进行营养物质表观消化率测定,试验预饲前和正饲期结束时均对试验动物进行空腹称重（晨饲前）以测定日增重（ADG）。结果表明:饲喂高比例棉籽壳比例的饲粮会影响多浪羊的表观消化率和平均日增重。其中H组DM和ADF的表观消化率显著低于L组（P＜0.05）,ADG、CP、NDF和OM的表观消化率低于L组,但不存在显著差异（P＞0.05）。试验四:饲喂高低比例棉籽壳饲粮对多浪羊瘤胃菌群结构的影响本试验设计与分组同试验一。在正饲期的第25～27 d,于晨饲前采集每只羊的瘤胃液置于50 m L。利用第三代全长扩展子和16S r RNA高通量测序技术测定瘤胃细菌、真菌和原虫的组成及菌群结构。结果表明:饲喂高低比例棉籽壳饲粮后H组与L组两个处理组瘤胃菌群结构存在显著差异（P＜0.05）。在门水平上H组拟杆菌门（Bacteroides）的相对丰度显著高于L组（P＜0.05）,而广古菌门（Euryarchaeota）相对丰度显著低于L组（P＜0.05）。其中H组拟杆菌属相对丰度显著高于L组（P＜0.05）,而真杆菌属（Eubacterium）、腔隙杆菌属（Lachnoclostridium）、月形单胞菌属（Selenomonas）和甲烷短杆菌属（Methanobrevibacter）相对丰度显著低于L组（P＜0.05）。H组的总甲烷菌相对丰度显著低于L组（P＜0.05）。在属水平上H组甲氧杂纤杆菌属（YE315Methanobrevibacter sp.YE315）、甲氧杂化杆菌米勒科（Methanobrevibacter millerae）、甲基短杆菌戈特沙尔基（Methanobrevibacter gottschalkii）和口腔甲氧短杆菌（Methanobrevibacter oralis）的相对丰度均显著低于L组（P＜0.05）。饲喂高比例棉籽壳饲粮对于多浪羊厌氧真菌的相对丰度没有显著差异（P＞0.05）,但在种水平上,Neocallimastix californiae的相对丰度H组显著低于L组（P＜0.05）。两组的瘤胃原虫主要由两个科:头毛虫科（Ophryoscolecidae）和均毛虫科（Isotrichidae）,六个属:内毛属（Entodinium）、真双毛属（Eudiplodinium）、Epidinium、均毛属（Isotricha）、多甲多泡双毛属（Polyplastron）、头毛属（Ophryoscolex）以及十个种组成。H组与L组总纤毛虫相对丰度和总瘤胃原虫的相对丰度均没有显著差异（P＞0.05）,在种水平上也没有显著差异（P＞0.05）。在碳水化合物酶家族上,H组与L组瘤胃内容物中共检测到359个碳水化合物酶家族,其中两个处理组之间有显著差异的酶家族有9个（GH2、GH9、GH51、GH97、CBM6、CE6、CE10、dockerin和AA6）。其中有7个酶家族（GH2、GH9、GH51、GH97、CBM6、CE6、CE10）的基因相对丰度在H组显著升高（P＜0.05）,2个组（dockerin和AA6）显著降低（P＜0.05）。在H组升高的酶家族功能主要包括多糖和糖苷水解酶活,降低的主要是苯醌还原酶和纤维小体的关键组建支架蛋白。结论综上所述,在保持饲粮等能等氮和精粗比一致时,饲喂高比例棉籽壳饲粮升高瘤胃p H值,降低瘤胃NH3-N浓度,降低丙酸和戊酸浓度,提高羧甲基纤维素酶活性,虽然降低了DM和ADF表观消化率,但对CP、OM表观消化率和ADG不存在显著性差异;多浪羊对于高比例棉籽壳饲粮的适应性表现为延长反刍时长,使较高NDF含量的高比例棉籽壳饲粮充分消化,富集更高丰度的瘤胃菌群和多糖和糖苷水解菌群参与微生物降解。