前言 女性乳腺肿瘤的发病率甚高。良性肿瘤中以纤维腺瘤为最多，恶性肿瘤中的绝大多数(98％)是乳腺癌。乳腺癌对女性危害极大，目前的治疗方法是以手术为主的综合治疗。相对而言，早期乳腺癌手术预后较好。但由于对乳腺癌病因尚不清楚，所以尚难以提出确切的病因学预防(一级预防)，因而加强这方面的研究有比较重要的现实意义。现在，对相关的β—连环素(β—cat)及E—cad／cat复合体的研究已引起大家的重视。 β—cat是胞浆内一分子量约92—95kD的蛋白质，它可以和多种蛋白相互作用发挥多种生物学作用。首先，β—cat是WNT信号转导通路的下游元件，WNT信号引起胞浆游离β—cat浓度升高并进入核内促进基因转录，调节细胞增殖分化。β—cat是WNT信号转导通路的关键调控点，其在肿瘤发生中的作用倍受关注。此外，β—cat也是构成粘附连接的E—cad／cat复合体的胞内重要组份。E—cad／cat复合体对于上皮极性、完整性的维持起重要作用。而β—cat异常导致整个复合体结构与功能异常在肿瘤浸润、转移过程中发挥重要作用。目前研究结果表明β—cat及E—cad／cat复合体在乳腺癌的发生、转移、侵润过程中起重要作用。但乳腺中重度不典型增生中β—cat及E—cad的表达鲜有报道，且E—cad的表达与乳腺癌淋巴结转移的相关性尚存在争议。针对这些问题，本实验通过超敏感的S-P免疫组化方法，检测β—cat及E—cad在乳腺肿瘤中的表达，阐明其意义及机制。 材料与方法 本实验石蜡包埋乳腺肿瘤组织来自中国医科大学第二附属医院病理科1999－2001乳腺肿瘤切除术后标本共87例，按病理诊断进行分组：乳腺病周围正常乳腺组织K组J 例入乳腺中重度不典型增生p组，19例入乳腺癌无淋巴结转移＊组，31例入乳腺癌合并淋巴结转移p组，27例人所有标本临床资料齐全。实验的主要工作试剂：p—cat单克隆抗体、E—cad单克隆抗体及SP试剂盒来自北京中山公司，其余相关试剂由病理室提供。实验方法：①将石蜡包埋的组织制作成 4 pm厚的切片，每个标本两张，常规二甲苯脱蜡，梯度乙醇水化。②3％过氧化氢和10％正常血清分别作用10、30分钟。③一抗37℃孵育0．5 ／J’时，H抗及SP复合物37℃孵育0．5小时，每步骤间PBS洗涤5分钟，3次。DAB显色。④苏木素复染，脱水，透明，封片。⑤0．01 moVL PBS作空白对照，已知阳性切片作阳性对照。结果判定：E—cad和 p—cat正常表达仅限于细胞膜，呈连续性、淡棕黄色或棕黄色，为（＋入不连续或不显示染色胖或不伴胞浆及胞核染色者为不正常表达，为（－八切片中阳性细胞率Z 90％为（＋入阳性细炮率10％－90％为（。入阳性细胞率ZIO％为（－人将（。）与（－）病例均列为表达失常病例，即阴性病例。每张切片细胞计数至少200个细胞，一般细胞计数在 500个细胞左右。统计学分析：E—cad和p—Cat在不同组织表达阳性率差异应用 X‘分析。检验标准 P＜0．05。 结 果 ＊p—cat在乳腺肿瘤中的表达：p—cat在各组表达的阳性率 ·2·不同。同正常乳腺组织阳性表达率80％相比，乳腺中重度不典型增生组、乳腺癌无淋巴结转移组、乳腺癌合并淋巴结转移组中p—Cat阳性表达率均有不同程度的降低，分别为26．32％、32．26％、25．93％；且与正常乳腺组织组差别均有统计学意义k‘值分别为7．635、6．sn、9．3．29，P＜O．01）。但这三组之间相比较阳性表达率差别无统计学意义。 2．E—cad在乳腺肿瘤中的表达：E—cad在各组羡达的阳性率亦不同。同正常乳腺组织阳性表达率90％相比，乳腺中重度不典型增生组、乳腺癌无淋巴结转移组、乳腺癌合并淋巴结转移组中E—cad阳性表达率亦有不同程度的降低，分别为57．89％、29．03％、＊．11％，但仅乳腺癌无淋巴结转移组、乳腺癌合并淋巴结转移组与正常乳腺组织组差别有统计学意义k‘值分别为 11．4＊20．72，P＜o．01人后三个组之间比较时乳腺中重度不典型增生组与乳腺癌万合并淋巴结转移组中的E一阴d阳性表达率差别均有统计学意义＊‘值分别为 4．809、11．52，P＜0．05），而E——cad的表达与乳腺癌淋巴结转移的关系不明显。 卞 论 p一连环素印—cat）是与跨膜粘附分子钙粘附素kadherin）相连的胞内特异蛋白质，它与钙粘附素、a一连环素及Y一连环素组成cadherihe cat复合体，普遍存在于各类上皮细胞及某些其它类型的实质细胞中，介导同型细胞的连接。早期的研究集中于p—cat在上皮细胞cadherin／ cat复合体的功能。近几年研究发现p—cat除了一部分与cadherin结合定位于细胞膜内侧，还有一部分游离于胞浆或与胞浆内某些蛋白质结合，参与多种信息传导途径，主要是WNT信息传导途径，发挥多种生物学作用。 WNT信号对于胚胎发育至关重要，它可以引起胞浆游离p一 ·3·cat浓度升高并进人核内促进基因转录，调节细胞增