薯蓣丸方证理论及调节HIV/AIDS肺脾气虚证免疫损伤的分子机制研究

来源 :河南中医药大学 河南中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xiaguangguang
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目的:  对比宋以前著作和后世《金匮要略》注本中薯蓣丸不同加载,探讨薯蓣丸证的方证理论。研究薯蓣丸证的辨证要素规律,完善薯蓣丸证的方证理论,推广薯蓣丸在新发疾病中的应用。应用基因芯片技术研究HIV/AIDS肺脾气虚证患者的免疫损伤机制,并应用薯蓣丸对患者进行治疗,研究薯蓣丸在治疗HIV/AIDS肺脾气虚证免疫损伤中的分子机制。  方法:  1、对比归纳宋以前相关著作对薯蓣丸的不同记载和后世《金匮要略》注本对薯蓣丸的适用症、方药组成等的描述和注解,探讨薯蓣丸证的病因病机、组方和配伍、学术思想和化裁应用等理论,研究薯蓣丸的方证理论;  2、制作《薯蓣丸证候要素和方药信息采集表》,对应用薯蓣丸的现代文献进行检索,提取文献中薯蓣丸证的病位证素、病性证素、临床症状和方药组成等资料,对病位证素和病性证素进行频数统计、聚类分析和因子分析,找出薯蓣丸证中的高频证素以及高频证素之间的相关性;  3、应用薯蓣丸对HIV/AIDS肺脾气虚证患者进行治疗,观察临床症状,对比治疗前后证候诊断量表积分的变化,检测治疗前后免疫细胞指标变化,应用基因芯片技术检测治疗前后免疫相关基因表达情况。  结果:  1、宋以前薯蓣丸的记载有不同的版本,对比发现记载较多的为《金匮要略》薯蓣丸和《备急千金要方》无比薯蓣丸,其他著作和注本对仲景薯蓣丸的适用症有所补充。  2、研究发现文献中薯蓣丸证中共涉及24个证素,其中病位证素9个,频率最高的为肺(89.16%),其他频率依次为:脾(77.11%)>肾(26.51%)>心神(脑)(25.30%)>肝(6.02%)>上脘(4.82%)>皮肤(2.41%)>筋骨(2.41%)>少腹(1.20%);病性证素中频率最高的为气虚(98.80%),其他依次为血虚(60.24%)>外风(24.10%)>精(髓)亏(22.89%)>瘀(蓄)血(19.28%)>阳虚(18.07%)>寒(8.43%)>阴虚(6.02%)>湿(4.82%)>劳倦(4.82%)>七情内伤(4.82%)>动(内)风(4.82%)>气滞(3.61%)>水气(1.20%)>气陷(1.20%);聚类分析结果中显示高频证素聚集为2类,C1是:肺、气虚、脾、血虚;C2是外风、阳虚、精(髓)亏、心神(脑)、瘀(蓄)血、肾;因子分析中提取6个公因子,高频证素在6个公因子中的分布情况为:F1:肺、外风、寒、阳虚;F2:肝、肺、外风、瘀(蓄)血、心神;F3:精(髓)亏、心神(脑);F4:气虚、血虚、心神;F5:肝、脾;F6:脾、肺、阴虚。  3、薯蓣丸治疗HIV/AIDS肺脾气虚证患者后,临床症状有所改善,证候诊断量表积分降低,治疗前后差异具有显著统计学意义(p<0.05),CD4+细胞绝对值升高,具有显著统计学意义(p<0.05),CD8+细胞有降低趋势,但不具有统计学意义(p>0.05),病毒载量在一定程度上降低,不具有统计学意义(p>0.05)。  4、基因芯片结果分析得出HIV/AIDS肺脾气虚证患者有28个免疫相关的mRNA异常表达,其中包括TNFSF10、CX3CR1、CD274、RSAD2、CCR2等10个上调基因,以及IL8、PTGS2、NFKBIA、NFKBIZ、EGR1等18个下调基因,主要与免疫应答、外伤反应、防御反应、迁移和炎症反应等免疫功能相关;涉及肿瘤坏死因子通路、NF-kB通路、细胞因子通路、趋化因子通路、Toll样受体通路和NOD样受体通路等;且差异基因之间存在相互调控关系,构成相互关系分子网络图。  5、薯蓣丸对HIV/AIDS肺脾气虚证患者治疗后,治疗组患者的GBP1、NFKBIA、IL8、FOS、NFKBIZ、PTGS2基因表达mRNA向正常对照组转归。  结论:  1、《金匮要略》薯蓣丸证的病位主要肺、脾、肾,涉及心、肝,病因有气虚、血虚、精(髓)亏、阳虚、风、寒、湿、瘀等,病性为虚实夹杂;病机为正虚不能抗邪,邪气耗损导致全身气血阴阳脏腑的俱亏;主要适用于气短、神疲、乏力、面色萎黄或苍白、心慌心悸、头晕、消瘦等气血亏虚的症状,恶风、畏寒、易感冒等肺阳气虚的症状,纳呆、肢体困重、腹泻等脾虚不能运化水湿的症状,不寐、健忘等心神失养的症状,以及久病累及肾而出现腰膝酸软等的症状;方药益气养血,补肺,运脾,益肾,祛风除湿等,具有重视脾胃、化生气血,重视阴中求阳、阴阳平衡,重视补中有行、扶正兼顾祛邪等特点;适用于符合其病机的多种慢性虚损性疾病。  2、薯蓣丸证与HIV/AIDS肺脾气虚证相符合。应用薯蓣丸治疗HIV/AIDS肺脾气虚证患者,能够改善患者临床症状,能通过升高CD4+细胞、降低CD8+细胞调节HIV/AIDS肺脾气虚证患者免疫功能,并在一定程度上降低病毒载量。  3、 HIV/AIDS肺脾气虚证患者出现动则气喘、易感冒、自汗、泄泻等症状,可能与免疫相关的mRNA异常表达,促进病毒的大量复制,使免疫细胞激活或凋亡异常,损伤患者的免疫功能有一定的相关性。  4、薯蓣丸能够改变NFKBIA、PTGS2、FOS、IL8、GBP1、NFKBIZ的表达,降低免疫细胞的异常凋亡和增强免疫细胞的活性,可能增加CD4+等细胞免疫细胞的数量和改变功能,也可能降低CD8+细胞的数量和病毒载量。薯蓣丸可能通过改变这些基因的表达减缓或降低HIV/AIDS肺脾气虚证患者的免疫损伤,具体机制还有待进一步深入研究。
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