目的:　　研究一种新型的抗菌缓释药膜——加替沙星胶联羊膜药膜的缓释作用，及其对细菌性角膜炎的治疗效果，为抗菌缓释药膜的研制及临床应用提供实验依据。　　本实验分为四部分：　　实验一：高效液相色谱法检测加替沙星纤维蛋白胶体外缓释作用　　实验二：加替沙星纤维蛋白胶体外抑菌实验　　实验三：加替沙星胶联羊膜药膜移植后兔房水药物浓度测定　　实验四：加替沙星胶联羊膜药膜治疗兔细菌性角膜溃疡的实验研究　　方法:　　实验一：精密称取15mg加替沙星溶于2.5ml纤维蛋白胶催化液中，与2.5ml主体液用混合注射器混合制成浓度3mg/ml的加替沙星纤维蛋白胶，放于15ml试管中，加入5ml生理盐水，将试管于37℃±0.2恒温振荡。每24h换一次生理盐水（每次均加入5ml生理盐水），连续10天,换出的生理盐水放于25ml溶量瓶中,再用生理盐水定溶至刻度，摇匀。高效液相色谱法（ high performance liquid chromatography， HPLC）测定各天生理盐水中加替沙星含量。　　实验二：按照实验一的方法，无菌条件下制备浓度3mg/ml加替沙星纤维蛋白胶，置于无菌培养皿中分别保存5d、4d、3d、2d、1d。保存时加入1ml生理盐水使其保持湿润。每隔24h置换出之前保存的各天加替沙星纤维蛋白胶中的生理盐水。另配制浓度3mg/ml加替沙星溶液作为对照组。3组琼脂平板，每组6个，分别含金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌和肺炎链球菌。用直径3ml打孔器在琼脂平板上打6个孔，呈梅花状分布。在各组细菌平板的孔内填满保存了1－5d的加替沙星纤维蛋白胶和对照溶液液。常规培养24h，测量各组细菌平板抑菌圈直径。　　实验三：按照实验一的方法无菌条件下配制浓度3mg/ml加替沙星纤维蛋白胶，并与羊膜胶联，制成加替沙星胶联羊膜药膜。新西兰大白兔25只，随机分为5组，每组5只10眼。左眼为对照眼，右眼为实验眼，实验眼予以直径20mm加替沙星胶联羊膜药膜片缝合固定于角膜缘，对照眼滴入浓度3mg/ml加替沙星溶液。分别于术后和滴眼后1d、2d、3d、4d、5d双眼同时抽取兔眼房水0.2ml,各组每个时间点取5只眼。高效液相色谱法检测实验眼和对照眼家兔房水中加替沙星浓度。　　实验四：建立金黄色葡萄球菌感染的角膜溃疡家兔模型，分为生理盐水组、加替沙星滴眼液组、加替沙星胶联羊膜药膜移植组和单层羊膜移植组，观察各组溃疡愈合的时间，并通过大体、裂隙灯观察，细菌培养学试验和组织病理学检查比较各组治疗效果。　　结果:　　实验一：随着纤维蛋白胶的溶解，加替沙星在10天内持续释放，释放量逐渐下降，累计释放率75.21％，第1、2、3天释放量明显较多，释放率分别为25.47%、18.54%和11.84%，3天的累计释放率55.85％，后7天的释放量逐渐减少，释放率降低，累计释放率低于20％。　　实验二：加替沙星纤维蛋白胶及对照溶液对三种细菌均有较明显的抑菌作用。加替沙星纤维蛋白胶在第1天的抑菌作用与对照组比较差异无显著性（p>0.05）；加替沙星纤维蛋白胶第2天和第3天的抑菌圈缩小不明显，抑菌作用与第1天比较差异无显著性（p>0.05），与对照溶液比较差异无显著性（p>0.05）；加替沙星纤维蛋白胶在第4天和第5天抑菌作用减弱，抑菌圈明显缩小，与第1天的抑菌作用比较差异有显著性（p<0.05）。　　实验三：实验眼各时间点房水中均可测出加替沙星，其中第1、2、3天房水中加替沙星浓度分别为0.274±0.004μg/ml、0.181±0.004μg/ml、0.107±0.003μg/ml，第4、5天房水浓度明显降低，仅0.038±0.001μg/ml、0.036±0.001μg/ml。对照眼在第1天房水中加替沙星浓度为0.210±0.003μg/ml,与实验眼第1天相比，差异有显著性意义(P＜0.05)。　　实验四：加替沙星滴眼液组和加替沙星胶联羊膜移植组角膜溃疡在7－8d愈合，溃疡处形成角膜白斑，其余角膜透明，细菌培养阴性，组织病理学检查角膜上皮形成，实质层见个别中性白细胞。生理盐水组和单层羊膜移植组溃疡愈合天数为13.7－20d，其中单层羊膜移植组有一眼穿孔。溃疡愈合后形成灰白色混浊斑，其余角膜混浊，并有新生血管形成，细菌培养阳性，组织病理学检查角膜上皮虽然修复，但不平整，实质层较多中性白细胞。　　结论:　　1、通过高效液相色谱法显示，随着纤维蛋白胶的溶解，加替沙星在体外具有缓释作用。　　2、体外抑菌试验显示加替沙星纤维蛋白胶具有持续抑菌作用，随着时间的延长，抑菌作用缓慢减弱。　　3、加替沙星胶联羊膜药膜移植到眼表后，在房水中可检测出加替沙星浓度，说明该药膜中的药物能缓慢释放并渗透到眼内。　　4、加替沙星胶联羊膜药膜对金黄色葡萄球菌性角膜溃疡具有良好的治疗作用，开辟了治疗细菌性角膜溃疡另一途径，为其用于临床提供了初步实验依据。