论文部分内容阅读
目的APOE基因是一个编码与脂蛋白相关的基因。载脂蛋白E异常甲基化与阿尔茨海默病(AD)有关,而AD与ASD可能有重叠机制。基因研究表明,ApoE基因变异与ASD有关,但其甲基化是否与ASD有关证据欠充足。本研究的目的是探讨APOE甲基化是否与ASD有关。材料和方法(1)我们共获得135个血液样本,其中病例组研究选择自2015年9月至2017年9月期间在中国浙江省宁波市康宁医院门诊或住院的自闭症谱系障碍患儿62例,正常对照组健康儿童73例。入组的全部实验组对象的必须都满足DSM-Ⅳ的中ASD相关的诊断条目,同时有2个当下使用的最广泛的量表(ABC量表和CARS量表)对验组对象的儿童执行较为可靠的协助评估病情。实验伦理学方面,告知全部接受实验的孤独症患儿的家属或监护人知情同意后,经过宁波市康宁伦理委员会讨论评估后方可准许实验。(2)所有参与实验的儿童需要抽取的外周静脉血的体积大约为2ml,之后提取提纯其中的DNA。于DNA亚硫酸盐转化后,采用SYBR Green荧光定量甲基化特异性PCR技术检测APOE基因特定位点的CpG位点甲基化水平。(3)利用SPSS软件18版这一款常用的统计软件对实验结果和实验数据执行方法学统计及客观分析。本实验的核心研究和目的就是了解实验组ASD患儿和对照组中ApoE甲基化差异,而独立样本t检验很好的承担了该主要统计任务。ASD患儿的ApoE基因甲基化和ASD患儿相关的临床项目之间的相关性使用Spearman秩检验进行评测。p<0.05,差异有统计学意义。结果我们的研究结果表明,ASD儿童ApoE的基因甲基化显著高于健康对照组(PMR中位数:33.36%比10.61%,P=2.36e-10)。在单纯男性的研究对象者中,实验组的ApoE基因甲基化程度比对照组增高显著(PMR中位数为:32.12%比11%,P=8.51e-7)。在单纯女性的研究对象者中,实验组的ApoE基因甲基化程度比对照组增高同男性组结果相似。(平均PMR:43.35%比7.87%,P=4.18e-6)。此外,ROC曲线分析,其特异性为72.6%,而其灵敏度为93.5%,在95%可信区间为0.741-0.893时,AUC为0.817,P=2.36e-10。进一步的性别亚组分析显示,男性有相似的结果(AUC=0.773,95%可信区间:0.682-0.865,灵敏度:93.9%,特异性:67.7%,P=8.52e-7)。由于女性人数有限,我们无法对女性进行ROC曲线分析。结论ApoE基因甲基化与ASD有关。未来研究可能需要探索外周血中载脂蛋白E甲基化作为诊断ASD的标志物。