钙网蛋白(Calreticulin,CRT)是存在于内质网(Endoplasmic Reticulum,ER)中的钙结合蛋白，可维持细胞钙离子稳态，并可作为分子伴侣辅助糖蛋白正确折叠。近年来研究还发现，CRT不仅仅是停留在ER当中，还能定位到细胞膜。　　此外，CRT还可以可溶性的形式释放到细胞外，本实验室前期发现自身免疫病患者血清中可检测到CRT，并且重组的CRT具超强免疫刺激活性，并且rCRT多聚体比rCRT单体的免疫刺激活性要强一百倍。对CRT功能片段进一步分析发现 rCRT/150-230可形成依赖于二硫键的多聚体，是具有超强免疫刺激活性的最小片段。本课题利用基因工程技术对rCRT/150-230的Cys163进行突变，发现rCRT/150-230C163A不能形成依赖于二硫键的多聚体，并且体外不能刺激小鼠腹腔巨噬细胞释放TNF-a以及小鼠脾细胞的增殖，体内也不具有免疫原性。CRT全长具有三个半胱氨酸位点，进一步对rCRT的三个半胱氨酸位点分别突变以及组合突变，发现rCRT的多聚化并不依赖于半胱氨酸所形成的二硫键，并且突变前后rCRT免疫刺激活性没有显著变化。rCRT/39-272同时具有三个半胱氨酸，可形成规则的二聚体、四聚体和寡聚体，提示其多聚化可能依赖于分子间二硫键。但是与rCRT类似，半胱氨酸位点的突变同样不影响rCRT的多聚化以及免疫刺激活性。　　我们由此得出结论，多聚化程度高的rCRT/150-230WT比单体rCRT/150-230C163A具有更强的免疫生物学功能，而rCRT、rCRT/39-272及其突变体由于相似的多聚化程度，在免疫生物学功能上没有明显的差异。对可溶性CRT理化性质与免疫生物学功能的研究将有助于解释CRT理化性质的改变与自身免疫病之间的关系。