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微生物驱油是一种新型的采油技术,它是利用微生物在油藏条件下的代谢,改变原油组分,从而提高原油采收率,其中微生物产表面活性剂提高采收率是微生物驱油的一个重要组成。微生物本身及其代谢产物由于受地层条件诸多因素影响,如何寻找最佳的培养条件,提高微生物的作用效率成为关注的热点。 本论文从新疆油田区块采集油水样品,筛选产表面活性物质的菌株,对筛选出的Cyl菌进行了具体研究。 通过菌株的形态学、生理生化特性以及分子生物学方法对菌株进行了鉴定:确定Cyl为一株铜绿假单胞菌。 本论文以菌体浓度及产表面活性物质情况为评价指标,优化Cyl发酵培养基。产表面活性剂情况通过表面张力的降低及排油圈的大小定量评价。在原有发酵培养基的基础上添加一定比例的微量元素,通过响应面法优化培养基中各组分浓度,得到优化后培养基:NaCl.79g/L,MgSO47H2O0.1g/L,(NH2)2CO0.5g/L,NaH2PO41g/L,EDTA0.2g/L,KH2PO4 lg/L,K2HP04.3H202g,(NH4)2SO40.59g/L,原油22.5g/L,甘油20g/L(适量),FeSO4.7H2O0.0lg/L,CaCl20.01g/L,MnSO40.01g/L,在此培养基下培养,排油圈直径增大了50%左右。 研究菌株Cyl最佳的培养条件,选取接近油藏实际的温度、pH、矿化度,以此为三个因素通过正交试验,进行培养条件优化,培养温度为32℃,pH为7.5,矿化度为7.7728g/L时,效果更佳。其中针对影响菌株生长代谢的重要因素温度,本文重点研究了不同温度下菌株的生长代谢情况,了解了菌量与表面活性剂产量随时间的变化情况。在油藏条件32℃时,菌量和表活剂产量达到最大,菌量可达lO11cfu/mI,表活剂产量约为1.79g/L。通过研究发酵液的乳化过程得知,发酵液在4-5天达到最佳的乳化效果。 提取纯化表面活性剂,对纯化的生物表面活性剂进行薄层层析、红外光谱分析,初步确定代谢产物为鼠李糖脂类表面活性剂。