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研究背景转移、复发是一个多个步骤、多个环节组成的的连续复杂的动态过程,卵巢癌患者极易发生盆腹腔内的广泛播散转移。因此,如何才能更好地控制卵巢癌细胞侵袭转移成为卵巢癌研究探索的重点及难点。上皮间质转化,即具有极性、排列规则的上皮细胞失去极性,转化成间质细胞,在此过程中并获得侵袭和迁移能力,这是肿瘤发生的早期事件。E-cadherin、Vimentin是EMT相关蛋白,Vimentin是间质细胞最主要的中间纤维,其表达升高可以导致E-cadherin表达缺失,同时会干由E-cadherin介导的细胞间黏附作用。转录因子FOXC1作为叉头框家族(FOX家族)的一员,早期发现其主要与Axenfeld-Rieger综合征有关,目前研究证实FOXC1与肿瘤的上皮间质转化现象及肿瘤侵袭转移密切相关。实验结果显示FOXC1作为转录因子通过作用于靶基因的启动子或与其他转录因子相互作用,通过上皮间质转化、细胞信号转导等途径影响肿瘤细胞的侵袭和转移。但是FOXC1是否参与了上皮性卵巢癌中EMT的发生需要进一步探讨。因此,研究FOXC1与上皮间质转化在上皮性卵巢癌的发生发展至关重要。研究目的通过检测良性上皮性卵巢肿瘤、交界性上皮性卵巢肿瘤以及上皮性卵巢癌组织中FOXC1与EMT相关因子的蛋白表达水平并结合临床病理学参数、患者生存率进行分析,同时使人卵巢癌细胞SKOV3中FOXC1过表达从而检测EMT相关因子的变化情况,从而探讨在上皮性卵巢癌中转录因子FOXC1表达情况及意义,并分析其对上皮间质转化的作用。研究方法研究对象:组织水平:选取2010年1月到2013年1月郑州大学第三附属医院临床病理资料完整的卵巢病变患者130例,其中上皮性卵巢癌70例,交界性上皮性卵巢肿瘤30例,良性上皮性卵巢肿瘤30例。卵巢癌患者均行肿瘤细胞减灭术。细胞水平:由本实验组提供FOXC1过表达SKOV3慢病毒稳定株细胞、阴性对照组细胞和空白对照组细胞。研究方法应用免疫组织化学SP法检测上述130例卵巢病变组织中FOXC1、E-cadherin和Vimentin的蛋白表达水平,并随访患者,比较组织中FOXC1、E-cadherin和Vimentin表达差异患者的3年累积生存率,联系临床及病理参数进行相关性分析。体外培养上述3组细胞,采用qRT-PCR和Western-blot方法检测上述3组FOXC1、E-cadherin和Vimentin mRNA和蛋白表达情况,分析转染前后卵巢癌细胞FOXC1、E-cadherin和Vimentin mRNA和蛋白表达的变化。统计学方法:分类变量采用Pearsonχ2检验或Fisher确切分析法。定性资料的相关性分析采用配对资料的关联性分析,求得Pearson列联系数(rp)。应用Kaplan-Meier生存曲线分析患者3年生存率,应用Log-rank检验生存率组间差异性。定量资料以均数士标准差(x±s)表示,qRT-PCR和Western blot结果各组间数据比较,正态分布的采用单因素方差分析,偏态分布的采用Kruskal-Wallis秩和检验。P值均为双侧检验,P<0.05表明差异有统计学意义。结果1.上皮性卵巢癌、交界性上皮性卵巢肿瘤、良性上皮性卵巢肿瘤组织中FOXC1蛋白的阳性表达率分别为40%、46%、76%,比较差异有统计学意义(P<0.05)。2.在良性卵巢肿瘤、交界性卵巢肿瘤及上皮性卵巢癌组中,E-cadherin的阳性表达率分别为80.0%、50.0%、79.5%,3组间比较差异有统计学意义((P<0.05)。3.在良性卵巢肿瘤、交界性卵巢肿瘤及上皮性卵巢癌组中,Vimentin的阳性表达率分别为7.1%、40.0%,57.1%,3组间比较差异有统计学意义((P<0.05)。4.上皮性卵巢癌组织中,FOXC1蛋白表达与E-cadherin蛋白表达呈正相关(r=0.446,P=0.000),FOXC1蛋白表达与Vimentin蛋白表达呈负相关(r=-0.295,P=0.014)。5.上皮性卵巢癌组织中FOXC1蛋白低表达与肿瘤的临床分期、分化程度、淋巴结转移相关(P<0.05),与患者年龄、肿瘤大小、组织分型无关。E-cadherin低表达与上皮性卵巢癌的临床分期、分化程度、淋巴结转移有关(P均<0.05),与患者年龄、肿瘤大小、组织分型无关。Vimentiin高表达与上皮性卵巢癌的临床分期晚、分化程度、淋巴结转移有关(P均<0.05),与患者年龄、肿瘤大小、组织分型无关。6.上皮性卵巢癌组织中FOXC1、E-cadherin阳性患者3年累计生存率为82.1%、80.6%,高于 FOXC1、E-cadherin 阴性患者 69.0%、69.2%,Vimemtin阳性患者3年累计生存率为70%,低于Vimemtin阴性患者80%(P均<0.05)。7.Western-blot 和 qRT-PCR 方法检测 FOXC1、E-cadherin 的蛋白和 mRNA表达发现FOXC1过表达组较空白对照组及阴性对照组明显升高(P均<0.05);FOXC1过表达组Vimentin的蛋白和mRNA表达较空白对照组及阴性对照组明显降低(P均<0.05)。结论1.FOXC1在上皮性卵巢癌中表达下调或缺失,可能参与了上皮性卵巢癌的发生发展;2.FOXC1的表达缺失在上皮性卵巢癌中可能与E-cadherin降低、Vimentin升高有关;3.FOXC1的表达缺失可能通过降低E-cadherin、升高Vimentin介导在上皮性卵巢癌EMT的发生。