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目的:研究新疆鹿蹄草乙醇提取物的最佳提取工艺。制备AlCl3所致Alzheimer氏病(AD)模型小鼠;观察鹿蹄草乙醇提取物(EEP)对Alzheimer氏病模型小鼠学习记忆的影响,并初步探讨其相关作用机制。 方法: 1.EEP最佳乙醇提取工艺:采用单因素和正交设计-重复试验法,以总黄酮含量和浸膏得率的综合评分为指标,考察乙醇浓度(A)、粉碎粒度(B)、提取时间(C)及提取次数(D)对提取鹿蹄草的影响。 2.制备拟AD模型小鼠:将60只小鼠随机抽取10只,雌雄各半,作为空白对照组,其余采用皮下注射三氯化铝(60mg/kg,0.1ml/10g)连续给药14天,制备AD模型小鼠。 3.EEP对AD模型小鼠的影响:将60只小鼠随机分为6组,每组10只,分别为:空白对照组、AlCl3模型组、维生素E阳性组、EEP给药组(低剂量组(200mg/kg)、中剂量组(400mg/kg)、高剂量组(800mg/kg))。造模后灌目给药,每天一次,共14天。采用埋藏小球实验法、被动回避跳台实验及Y型迷宫实验检测小鼠学习记忆能力;按试剂盒说明测定脑组织SOD活性、MDA含量、AChE活力,及血清中SOD活性和MDA含量;HE染色光镜下观察海马神经细胞、嗅球神经细胞及嗅小球神经细胞形态学变化;TUNEL法光镜下观察小鼠海马神经细胞及嗅球细胞凋亡。 结果: 1.EEP最佳乙醇提取工艺中,粉碎粒度、提取时间和提取次数三个因素对鹿蹄草乙醇提取物的提取有极显著影响。 2.AlCl3所致AD模型小鼠:与对照组比较,小鼠学习记忆能力具有统计学差异。 3.与模型组相比EEP可提高AlCl3所致AD模型小鼠的学习记忆能力;上调SOD活性;降低MDA含量;下调AChE活力;显著抑制嗅球及海马神经细胞的凋亡。 结论: 1.鹿蹄草乙醇提取物的最佳提取工艺为:选择70%的乙醇,20目的粉碎粒度,每次提取2小时,提取3次。 2.AD模型造模成功。 3.EEP可明显改善AlCl3所致AD模型小鼠嗅觉功能障碍和学习记忆能力;对AlCl3所致AD模型小鼠嗅觉和脑损伤有防治作用;其作用机制可能与清除自由基损伤、降低脂质过氧化反应、提高胆碱能神经元功能和抑制细胞凋亡等机制相关。