小鼠体细胞核移植技术不仅可以为研究动物胚胎发育、细胞和组织分化、基因表达调控、核质相互作用提供技术平台，而且在建立人类疾病动物模型方面也有着重要的作用和意义。本实验以B6D2F1品系小鼠的胎儿成纤维细胞和卵母细胞作为核、质供体，通过不同去核方法、融合方案、体外培养条件以及PEG／DMSO和TSA等试剂的应用，对小鼠体细胞核移植重构卵去移核后的存活情况、电融合情况和激活后重构胚的着床前发育情况进行比较，筛选合适的实验条件，为本实验室小鼠体细胞核移植技术的建立和应用打下基础。结果如下：一、持卵方法、去核针口径对小鼠卵母细胞去移核效果的影响：（1）以改进的双持卵针法去移核后重构卵的存活率（82.05％）极显著高于传统的单持卵针法（22.35％）（P＜0.01）；（2）以14～16μm内径组去核针去移核后重构卵存活率为80.77％，显著高于10～12μm组和20～22μm组（P＜0.05）。二、PEG／DMSO对供核细胞的处理、不同的融合液、融合电参数和细胞代次对融合率的影响：（1）以PEG／DMSO对供核细胞预处理5分钟后所得融合率显著高于同条件下未处理组（51.11％vs 25.64％）（P＜0.05）；（2）融合液中含0.1 g／L PVA的各组融合率均高于无PVA组；重构卵在甘露醇浓度为0.32mol／L的融合液中的融合率（48.21％）高于其他甘露醇浓度组的融合率（27.78％，41.67％和30.11％）；（3）针状电极融合槽的融合率（42.31％，43.13％）高于其他参数条件相同时平行丝状电极融合槽组（30.43％，33.33％），其中又以在2000V／cm，20μs，2个脉冲时，交流电预处理30秒组最高（43.13％）；（4）供核细胞传代一次后融合率随着传代次数的增加而下降。三、TSA和培养系统对重构胚体外发育率的影响：（1）组蛋白去乙酰化酶抑制剂trichostatin A能够提高重构胚的发育率；（2）不同的体外培养系统（CZBG，KSOM，KSOM+Vero饲养层细胞）中，以KSOM体系培养重构胚时卵裂率（39.06％）高于其它组（34.14％，35.90％），而KSOM+Vero饲养层培养体系中桑葚胚发育率（15.38％）高于其它组（8.54％，12.50％）。实验结果表明，本实验室采用双持卵针法，内径14～16μm去核针可以获得较高的去移核后重构卵存活率；使用针状电极融合槽，当融合液中甘露醇浓度为0.32mol／L，并添加PVA时，在2000V／cm，20μs，2个脉冲，交流电预处理30s条件下可以得到相对较高的重构卵融合率；PEG／DMSO对供核细胞的预处理显著提高了融合率；TSA和vero饲养层细胞可以促进重构胚的桑葚期／囊胚期发育率。