固定化酶制备共轭亚油酸与支链氨基酸的工艺研究

来源 :大连工业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:dahaneralpha
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脂肪酶是一种高效的生物催化剂,能参与酯化反应、转酯反应、酸解反应、醇解反应、氨解反应以及最主要的水解等多种反应,在食品工业、医药卫生、生物柴油、洗涤工业、手性化合物及环保等方面都有重要应用。本文主要研究脂肪酶水解方面的应用,即固定化脂肪酶水解制备共轭亚油酸及脂肪酶水解制备L-亮氨酸。工业生产上制备共轭亚油酸一般需先制得共轭亚油酸甲酯,然后采用碱催化水解。碱催化制备的CLA颜色较深,反应过程复杂且易皂化,并产生大量废水。通过使用固定化脂肪酶水解共轭亚油酸甲酯能很好的解决上述问题。将混合氨基酸异丁酯化后,蒸馏得到纯度高的L-亮氨酸异丁酯。继续处理的常用方法为化学法催化水解,该方法的缺点是需要强酸硫酸作为催化剂,反应过程产生大量的盐和废水.本论文通过游离脂肪酶水解L-亮氨酸异丁酯制备L-亮氨酸方法解决上述问题。本论文通过对制备CLA和L-亮氨酸水解工艺下的水解条件进行了优化,获得了最佳的工艺参数。主要研究结果如下:1.固定化脂肪酶水解共轭亚油酸甲酯的工艺研究:选择离子交换树脂A2制备固定化脂肪酶,确定共轭亚油酸甲酯为水解制备共轭亚油酸的原料。通过进行单因素实验确定了最佳水解工艺参数:底物共轭亚油酸甲酯的质量浓度为20%,固定化脂肪酶A2加量为料液质量的4%,反应温度为50℃,在抽真空的条件下,旋转蒸发反应4h,共轭亚油酸的收率为98.5%,固定化脂肪酶循环利用能达到10次以上。2.脂肪酶水解L-亮氨酸异丁酯的工艺研究:选择游离脂肪酶作为水解用酶。通过进行单因素及正交实验获得脂肪酶水解L-亮氨酸异丁酯制备L-亮氨酸最佳的工艺参数:选用Gly-NaOH缓冲液体系提取脂肪酶粉A获得游离脂肪酶,并用L-亮氨酸饱和反应酶液,L-亮氨酸异丁酯加入量为2.0g,酯水物料比为1:13,反应温度为50℃,反应时间13h,摇床转速为170rpm的反应条件下,L-亮氨酸的收率为95.23%。通过使用不同种类的酶对L-异亮氨酸异丁酯进行水解,发现并没有水解效果。
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