研究背景类风湿关节炎(Rheumatoid arthritis,RA)是一种以关节炎症和滑膜细胞增殖为特征的全身性自身免疫性疾病,可造成关节结构破坏,甚至导致身体残疾,因此早期诊断和治疗尤为重要。糖皮质激素(Glucocorticoid,GC)是治疗RA的一个非常重要的药物,主要起到抗炎和免疫抑制的作用,广泛地应用于RA患者。大部分RA患者对GC敏感,但也有一部分患者应用GC效果不佳,甚至对GC抵抗,造成这部分患者对GC抵抗的原因成为近几年研究的热点。人们在研究中发现,糖皮质激素是通过与糖皮质激素受体结合而发挥作用的。糖皮质激素受体主要有两个亚型,即糖皮质激素受体α(GR-α)和糖皮质激素受体β(GR-β)。GR-α是与GC结合,介导GC发挥抗炎、免疫抑制等作用的功能性受体,它的含量及其与GC的亲和力与GC的疗效密切相关;而GR-β不能与GC结合,因此不能介导GC发挥作用,同时有研究发现GR-β对GR-α有特异性的拮抗作用,抑制GR-α对GC发挥功能,因此某些患者对GC抵抗可能与GR-β升高有关。还有研究发现,某些患者对GC抵抗不单单与GR-β升高有关,还可能与GR-α和GR-β比例失调有关,即GR-β/GR-α比值越高越容易对GC产生抵抗。除此之外,近年来还有学者在体外研究中发现某些促炎因子(如TNF-α)可上调GR,尤其是GRβ的表达达,而TNF-α在RA的发病中起着核心作用,因此推断GR两种亚型的表达异常除可能影响患者对激素的敏感性外,还可能参与了RA的疾病过程。因此,本研究拟对此问题进行探讨,从而进一步研究GR-α和GR-β在RA疾病过程中的作用以及与激素敏感性的关系。研究目的应用实时荧光定量聚合酶链反应(Real-Time Fluorescent-QuantitativePCR,RT-FQ-PCR)测定RA患者外周血单个核细胞(PBMC)中GR-α、GR-βmRNA的表达水平,并与骨性关节炎(OA)患者和健康人群进行对照,进而探讨GR-α、GR-β在RA患者疾病发生和发展过程中所发挥的作用;探讨GR-α、GR-β的表达水平与其它临床常用指标(如ESR、CRP、RF)的相关性,进而了解GR-α和GR-β与RA忠者疾病活动性的关系。研究方法连续选取2006年10月—2007年3月在北京协和医院风湿免疫科门诊的RA患者44例,并将其分为活动期和缓解期(其中活动期24例、缓解期20例),OA患者15例,健康对照组为20例,均符合各自的纳入标准与排除标准。提取所有研究对象外周血单个核细胞(PBMC)中的总RNA,逆转录成cDNA,用RT-FQ-PCR方法检测GR-α、GR-βmRNA的表达水平,并对所得结果进行统计学分析。研究结果1.GRα:RA患者GRα的表达水平明显高于OA组和正常对照组,统计学检验有显著性差异(P＜0.01)RA患者活动期和缓解期GRα的表达水平无明显差异(p=1.00)OA患者与正常对照人群GRα的表达水平无明显差异(P＞0.05)2.GRβRA患者GRβ的表达水平明显高于OA组和正常对照组,统计学检验有显著性差异(P＜0.01)RA患者活动期GRβ的表达水平明显高于缓解期,统计学检验有显著性差异(P＜0.01)OA患者与正常对照人群GRβ的表达水平无明显差异(P＞0.05)3.GRβ/GR-α的比值RA患者GRβ/GR-α的比值明显高于OA组和正常对照组,统计学检验有显著性差异(P＜0.01)RA患者活动期GRβ/GR-α的比值明显高于缓解期,统计学检验有显著性差异(P＜0.01)OA患者与正常对照人群GRβ/GR-α的比值无明显差异(P＞0.05)4.RA患者GR-α、GR-β与ESR、CRP、RF的相关性分析RA患者GR-α与ESR、CRP、RF均无明显相关性RA患者GR-β与CRP呈明显正相关(r=0.515,P=0.01),与ESR、RF无明显相关性结论1.应用RT-FQ-PCR检测外周血单个核细胞中GR-α、GR-βmRNA的含量具有较好的敏感性、特异性和可重复性;2.RA患者GR-α、GR-βmRNA表达水平明显高于正常人群,提示两者可能参与了RA的疾病过程。GRα和GRβ表达水平的升高可能是由一些促炎因子的刺激引起的,同时它们的升高还可能刺激其它炎症因子的表达增加,因此在这种炎症产生和发展的过程中GRα和GRβ可能起到了一定的作用;3.RA患者活动期和缓解期GRα的表达水平无明显差异,且GRα与ESR、CRP、RF均无相关性,提示GRα与RA患者的炎症程度无明显相关性;4.RA患者活动期GR-β的表达水平明显高于缓解期,并且和CRP呈明显正相关,提示GR-β与RA患者的炎症程度呈正相关;再结合以往研究发现GRβ升高与RA患者对激素抵抗有关,提示RA患者炎症反应越重越容易对GC产生抵抗。5.RA患者活动期GR-β/GRα的比值明显高于缓解期,结合以往研究GR-β/GRα的比值升高与患者对GC抵抗有关,进一步提示了处于疾病活动期的RA患者较缓解期患者更容易对GC产生抵抗,即炎症反应越重越容易对激素产生抵抗。