血糖波动对痰瘀互结型糖尿病大鼠甲状腺组织超微结构及细胞凋亡的影响

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目的 通过测定DM状态下不同血糖浓度甲状腺组织Bax、Bcl-2表达的变化,探讨不同血糖浓度对痰瘀互结型DM大鼠甲状腺功能损伤的程度及可能的损伤机制。方法 用高脂饲料叠加腹腔注射STZ复制的糖尿病痰瘀互结型大鼠模型,将其分为持续性高血糖组(N=10)和血糖波动组(N=10)及对照组。12周后处死,取双侧甲状腺称重,计算甲状腺的重量指数。免疫组织化学检测Bcl-2、Bax蛋白在甲状腺组织中的表达及扫描电镜观察甲状腺组织超微结构。结果 1.痰瘀互结型糖尿病大鼠甲状腺重量均高于N组,但P>0.05;痰瘀互结型糖尿病大鼠甲状腺重量指数均明显低于N组(P<0.01),而持续高血糖组与血糖波动组之间差异均无显著性意义。2.免疫组织化学分析:光镜下观察HE染色示N组甲状腺滤泡上皮细胞核染色为阴性,痰瘀互结型 DM大鼠甲状腺上皮细胞核内染色呈阴性或弱阳性,较N组增多。持续高血糖组与血糖波动组差异无显著性意义。图像分析结果:痰瘀互结型DM大鼠甲状腺组织免疫化学Bax染色阳性面积、平均光密度较N组增加,两模型组间Bax染色平均光密度比较无统计学差异;痰瘀互结型DM大鼠Bcl-2免疫组化染色阳性面积比和平均光密度均较N组减低(P<0.01)。痰瘀互结型DM大鼠Bcl-2/Bax的阳性面积比和平均光密度比均较N组下降(P<0.01)。持续高血糖组与血糖波动组差异无显著性意义。3.生化指标分析:与N组比较,痰瘀互结型糖尿病大鼠CHOL、FPG、HbAlc均较正常组明显升高,差异有统计学意义;持续高血糖组TRIG明显高于正常组(P<0.01),差异有统计学意义;血糖波动组FPG、CHOL明显低于持续高血糖组,差异有统计学意义;血糖波动组TRIG明显低于持续高血糖组(P<0.01),差异有统计学意义;持续高血糖组与血糖波动组HbA1c相近,差异无统计学意义。4.胰岛素测定:痰瘀互结型DM大鼠模型不论是持续高血糖组还是血糖波动组均出现高胰岛素血症,且两模型组与正常组大鼠间及两模型组之间存在明显差异。5.血糖波动指标分析:与N组比较,痰瘀互结型糖尿病大鼠MBG、LAGE、SDBG明显高于N组,差异有显著性意义;持续高血糖组与血糖波动组间MBG、LAGE、SDBG均存在明显差异,有显著性意义。6.甲状腺功能测定:痰瘀互结型DM大鼠模型不论是持续高血糖组还是血糖波动组游离T3、游离T4均明显低于正常组,且差异有显著性意义;持续高血糖组、血糖波动组之间差异无显著性意义。各组间TSH差异无显著性意义。7.甲状腺超微结构分析:12周末正常对照组大鼠甲状腺组织未见明显病理变化,痰瘀互结型DM组滤泡上皮细胞多呈扁平状,微绒毛缺失。持续高血糖组与血糖波动组比较差异无显著性意义。结论 1.高糖高脂饲料喂养联合一次尾静脉注射小剂量STZ可以成功制备痰瘀互结型糖尿病大鼠模型。2.痰瘀互结型大鼠甲状腺功能低下,甲状腺组织超微结构的改变提示存在甲状腺滤泡上皮细胞的损伤;其甲状腺上皮细胞Bax表达增加、Bcl-2表达减少、Bcl-2/Bax显著下降,DM状态下甲状腺滤泡上皮细胞凋亡增多,是甲状腺损伤的可能机制之一。但持续高血糖组与血糖波动组差异无显著性意义,说明血糖波动对糖尿病状态下甲状腺组织无明显损伤。
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