IL-38在炎症性肠病中的表达及作用研究

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【目的】探讨IL-38在炎症性肠病(inflammatory bowel diseases,IBD)患者和葡聚糖硫酸钠(dextran sulphate sodium,DSS)诱导的结肠炎小鼠中的表达及细胞来源,并通过干预DSS小鼠中IL-38表达探究其在IBD发生中的作用及机制。【方法】收集IBD病人和对照者外周静脉血和结肠活检标本,建立DSS结肠炎小鼠模型,利用RT-q PCR和Western Blotting检测人和小鼠肠道组织IL-38 m RNA和蛋白表达,免疫组化和免疫荧光检测IL-38的细胞定位,酶联免疫吸附实验检测血清IL-38的表达。腹腔注射m IL-38重组蛋白干预DSS诱导的结肠炎小鼠,采用疾病活动指数、结肠长度及组织病理学评分进行炎症评估,RT-q PCR检测小鼠结肠组织中炎性因子的表达水平。体外培养RAW264.7细胞和骨髓来源的巨噬细胞,脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激后给予m IL-38重组蛋白干预,通过RT-q PCR检测炎性因子的表达。【结果】结肠组织中IL-38 m RNA表达在克罗恩病(Crohn’s disease,CD)和溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)患者中较对照者明显升高,而各组血清中IL-38的表达没有统计学差异,DSS和对照组小鼠肠道和外周血的IL-38表达结果与人体结果类似。免疫组化显示IL-38主要表达于人和小鼠粘膜固有层细胞。免疫荧光显示人和小鼠肠粘膜中IL-38主要来源于B细胞,小鼠中还有少部分来源于巨噬细胞。m IL-38重组蛋白干预DSS小鼠模型能显著改善小鼠体重下降和结肠长度缩短、减少疾病活动度评分和降低病理学评分,并明显下调小鼠结肠组织中IL-1β、TNF-?和CCL-2等炎性因子的基因表达。体外实验显示,给予m IL-38重组蛋白干预巨噬细胞,IL-38能明显抑制LPS诱导的RAW264.7细胞中IL-1β、IL-6、TNF-?、IL-10、CCL-2和CCL-7的m RNA表达,和骨髓来源的巨噬细胞中IL-1β、IL-6、TNF-?和CCL-7的m RNA表达。【结论】IL-38在IBD的肠粘膜炎症中发挥抑炎作用,可能通过抑制巨噬细胞炎症因子分泌发挥作用,是IBD治疗的潜在靶点。
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