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本实验以K562人慢性髓源白血病细胞为研究对象,研究了生物反应器规模化培养K562细胞的基本条件,另外通过MTT法、HE染色、流式细胞术、免疫荧光法和RT-PCR等手段从细胞形态学的变化、细胞周期、线粒体膜电位的变化、相关周期蛋白、相关凋亡蛋白及其基因的表达等方面探讨了硒酸软骨多糖对K562细胞的诱导凋亡作用及其作用机理。首先,对生物反应器规模化培养K562细胞的基本条件,即初始密度、培养基pH值和搅拌速度进行了研究,结果表明,K562细胞规模化培养的最佳条件为：细胞初始密度2.5×105个/mL,培养基pH值7.4,搅拌速度70r/min,该条件下细胞达到的最大生长密度为1.57×106个/mL。其次,研究了硒酸软骨多糖对K562细胞的增殖抑制及凋亡诱导作用。通过MTT法检测发现硒酸软骨多糖能显著抑制K562细胞的增殖,100μg/mL的软骨多糖作用K562细胞48h后,抑制率可达到80%,且这种抑制作用呈现出明显的浓度依赖性和时间依赖性。通过细胞形态显微镜观察、HE染色和Hoechst33342/PI双染发现硒酸软骨多糖能够使K562细胞出现体积缩小、染色质固缩等典型的凋亡特征。通过流式细胞术发现：(a)硒酸软骨多糖能够将k562细胞阻滞在S期,多糖处理48h后S期细胞数由40.75%增至62.93%；(b)罗丹明-123染色显示强荧光部分的细胞数量降低了18%,细胞线粒体膜电位显著下降。通过免疫荧光和ELISA法检测发现,硒酸软骨多糖处理后,细胞周期相关的Cyclin A、CDK2蛋白和Bcl-2蛋白表达减少,p21蛋白和caspase-9蛋白表达增多；通过实时定量荧光PCR技术对上述蛋白的mRNA表达进行了检测,实验结果与蛋白表达一致。以上结果说明硒酸软骨多糖能够显著抑制K562细胞的增殖并诱导其凋亡。本实验为利用细胞规模化培养生产疫苗、抗体等生物制品奠定了基础。