论文部分内容阅读
缺铁相关的FDR3基因是在缺铁胁迫下玉米根中诱导增强表达的基因，最初是从缺铁玉米根cDNA表达文库中筛选出来的。FDR3cDNA克隆为3.3Kb，包括具有1068bp开放读框的亚克隆，大小约为2.5Kb。把FDR3基因片段克隆到酵母表达载体pDBLeu上，然后通过电击和乙酸锂转化两种方法将重组质粒导入酿酒酵母Ctrl突变体（M3 mutant）中，采用酵母异源互补法进一步鉴定FDR3基因的功能。酵母突变体中铁高亲和系统的成员Ctrl缺失突变，培养基中不供给二价铁和铜，仅以柠檬酸三铁作为唯一的铁源，FDR3基因的表达能够恢复Ctrl突变体在该选择培养基中的表型生长。提取缺铁培养的小麦根总RNA，以FDR3基因片段（2.5Kb）为探针，进行Northern杂交分析，发现缺铁诱导增强FDR3相似基因表达，而且缺铁9、11天表达较强。在此基础上进行了fdr3p的疏水性分析，有几个疏水区；fdr3p的跨膜结构分析表明，它有三个跨膜结构域。所以，初步推断FDR3是禾本科中Fe（Ⅲ）转运系统的成员之一。