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EGF与IGF-Ⅰ均为生物体内具有重要生物学作用的生长因子,卵母细胞成熟与早期胚胎发育直接或间接地受着EGF和IGF-Ⅰ体系精确的调控。本研究利用免疫荧光和激光共聚焦扫描技术探讨了表皮生长因子受体(EGFR),类胰岛素生长因子(IGF-Ⅰ)及其受体在牛早期胚胎中的蛋白表达。同时,在牛卵母细胞成熟培养液中添加不同量的EGF、IGF-Ⅰ,对成熟后的卵母细胞检测核成熟率,观察生长因子对卵母细胞成熟的影响以及成熟液中生长因子的最佳添加浓度,结果如下: ① 在牛早期胚胎既受精卵到囊胚的发育阶段虽然不表达EGF的蛋白,但是EGFR的蛋白一直可以检测得到。实验发现从二细胞到囊胚均可见EGFR的表达,其主要分布在细胞膜上,随着发育天数的增加,表达量在增加。文献显示在牛体内早期胚胎发育阶段的子宫和输卵管中有EGF的表达分泌,说明在早期胚胎的发育过程中,EGF对牛早期胚胎的调控采用旁分泌的形式,同时EGFR的表达在时序上具有连贯性。 ② 从二细胞到囊胚对IGF-Ⅰ、IGF-Ⅰ R的免疫结果显示,IGF-Ⅰ体系在早期胚胎发育过程中一直有表达,同样也随着发育天数的增加,表达量也在增加。IGF-Ⅰ在细胞膜与胞质内均可见,受体主要位于质膜上。结果表明IGF-Ⅰ内蒙古大学硕士学位论文中文摘要体系在牛早期胚胎发育中有生物学作用,采用自分泌方式参与调控,表达具有时序连贯性。③在卵母细胞成熟培养液中分别添加ing/ml、long/ml、song/ml、IO0ng/ml、 Zoong/ml的EGF,1 Ong/ml、50ng/ml、loong/ml、15ong/ml、Zoong/ml的 IGF一I,观察体外成熟培养22小时后的卵母细胞成熟率。结果添加有EGF 实验组的成熟率分别是36.73%、42.18%、56.18%、53.67%、56.5%,同对 照组相t匕都较对照组的成熟率(34.040,0)高,且song/ml、loong/ml、 200ng/ml实验组的成熟率同对照组差异显著(P<0.05)。IGF一I实验组的成 熟率分别是38.46%、46.94%、58.73%、55%、58.7%,50ng/ml、100ng/ml、 15ong/ml、20ong/ml都较对照组的成熟率要高(38.60%),loong/ml、 15ong/ml、Zoong/ml实验组同对照组相比差异显著(p<0.05)。将50ng/ml的 EGF、1 00ng/ml的IGF一I共同添加在成熟培养液中得到的成熟率为75%, 同对照组相比(36.54%)差异极显著(P<0.01)。结果显示在牛卵母细胞成 熟培养液中添加EGF、IGF一I会提高卵母细胞的成熟率,并且随着浓度的增加,这种生物学作用将出现饱和性,最佳作用浓度为50ng/mlEGF、IO0ng/mllGF一I。