miRNA-630对BRCA-1高表达的三阴性乳腺癌细胞增殖的影响

来源 :内蒙古医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yolanda0104
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背景与目的近年来,涉及多种疾病的微小RNA(microRNA,miRNA)的研究和应用在生物学领域越来越受到关注。其在所有真核生物中发挥转录后调控作用,可以调节各种生理过程的基因表达和细胞内信号转导,其异常表达具有参与癌症发生、侵袭和转移的致癌或肿瘤抑制功能。其中miRNA-630已被证明参与了多种肿瘤的发生和进展,其中包括乳腺癌,为乳腺癌的治疗提供了实验依据。对于那些缺乏有效、特异性治疗靶点的肿瘤亚型,如乳腺癌易感基因-1(breast cancer susceptibility gene,BRCA-1)高表达的三阴性乳腺癌(triple-negative breast cancer,TNBC),miRNA-630也可能成为其新的治疗手段。将miRNA-630作为辅助工具应用于治疗似乎具有一定的前景。本研究目的探讨miRNA-630对BRCA-1高表达的TNBC细胞增殖的影响,最终实现为TNBC的预防和诊治提供新的思路。方法转染miRNA-630mimic、BRCA-1、miRNA-630mimic+BRCA-1、NC、miRNA-630inhibitor、miRNA-630inhibitor+BRCA-1至体外培养的TNBC细胞株(MDA-MB-231)中,通过qRT-PCR检测NC、miRNA-630mimic、miRNA-630inhibitor中miRNA-630的表达水平。MTT检测各组MDA-MB-231细胞增殖情况,同时通过Western blot检测各组MDA-MB-231细胞中P21、P53的表达情况。结果1.PCR实验结果显示与空质粒组相比,miRNA-630 mimic可以增加miRNA-630表达水平(p<0.05),而miRNA-630 inhibitor能大幅减少miRNA-630的表达水平(p<0.05)。2.MTT与Western blot实验结果显示,(1)与空质粒组相比,转染BRCA-1后,MDA-MB-231细胞的增殖减少(p<0.05),P21、P53表达水平增加(p<0.05),差异有统计学意义。(2)与空质粒组相比,转染miRNA-630mimic后,MDA-MB-231细胞的增殖减少(p<0.05),P21、P53表达水平增加(p<0.05),差异有统计学意义。(3)与转染BRCA-1的MDA-MB-231细胞相比,转染miRNA-630mimic+BRCA-1后,MDA-MB-231细胞的增殖减少(p<0.05),P21、P53表达水平增加(p<0.05),差异有统计学意义。(4)与空质粒组相比,转染miRNA-630inhibitor后,MDA-MB-231细胞的增值增加(p<0.05),P21、P53表达水平减少(p<0.05),差异有统计学意义。(5)与转染BRCA-1的MDA-MB-231细胞相比,转染miRNA-630inhibitor+BRCA-1后,MDA-MB-231细胞的增值增加(p<0.05),P21、P53表达减少(p<0.05),差异有统计学意义。结论miRNA-630在BRCA-1高表达的TNBC细胞株中为肿瘤抑制因子,具有负性调控作用,这可能在未来成为BRCA-1高表达的TNBC的生物治疗靶点,为TNBC的预防、诊断、治疗提供科学依据。
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