上皮性卵巢癌病人血清和肿瘤组织中KLK6、KLK8的表达及临床意义

来源 :河北医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:fh2019
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目的:卵巢癌是妇科死亡率最高的恶性肿瘤,其发病隐匿,进展迅速,70%~80%的卵巢癌病人发现时已为晚期,其5年生存率仅为20%~30%,主要原因是早期卵巢癌没有症状,病人难以早期就诊,因此上皮性卵巢癌的早期诊断成为丞待解决的课题。本研究通过检测激肽释放酶基因6(Kallikrein Gene 6,KLK6)、激肽释放酶基因8(Kallikrein Gene 8,KLK8)在上皮性良性卵巢肿瘤、交界性卵巢肿瘤及卵巢癌组织中及血清中的表达水平,探讨KLK6、KLK8在卵巢癌发生和侵袭中的作用,以及作为肿瘤标记物,与CA125比较,用于卵巢癌早期诊断及术后随访的价值,为卵巢癌的药物治疗提供科学的实验依据。方法:1免疫组织化法检测上皮性卵巢肿瘤组织中KLK6、KLK8蛋白的表达水平,其中良性卵巢肿瘤20例、交界性卵巢肿瘤11例、卵巢癌62例(浆液性囊腺癌33例,粘液性囊腺癌18例,子宫内膜样腺癌11例)并用计算机病理图像分析系统测量其灰度值(A值),计算平均值进行半定量分析。2比较上皮性良性卵巢肿瘤、交界性卵巢肿瘤及卵巢癌KLK6、KLK8阳性表达情况,以及KLK6及KLK8在卵巢癌组织中的阳性表达率与不同临床病理特征的关系。3酶联免疫吸附(Enzyme-linked Immunosorbent Assay,ELISA)双抗体夹心法检测血清激肽释放酶6(Human Kallikrein 6,hK6)、激肽释放酶8(Human Kallikrein 8,hK8)浓度,各组血清CA125浓度均由本院实验室采用电化学发光法常规测得。4比较上皮性良性卵巢肿瘤、交界性卵巢肿瘤及卵巢癌病人血hK6、hK8、CA125水平。分析卵巢癌组织中KLK6、KLK8表达的A值与血清浓度值之间的相关性。5根据文献给定的阳性标准,比较血清hK6、hK8、CA125检测用于卵巢癌诊断的敏感度及特异度。6应用SPSS12.0统计软件进行统计学分析,所有计量资料数据均以均数士标准差(x±s)表示,均数的比较采用单因素方差分析,组间均数两两比较采用LSD-t检验。计数资料采用χ2检验,不同组织学类型、临床分期及病理分级表达阳性率的比较采用χ2检验和Fisher精确概率法,卵巢癌组织中A值与血清浓度值之间的相关性采用Spearman等级相关分析,P<0.05为差异有统计学意义。结果:1 KLK6在上皮性良性卵巢肿瘤、交界性卵巢肿瘤及卵巢癌病人的组织中表达阳性率分别为15%(3/20)、63.6%(7/11)及61.3%(38/62),良性卵巢肿瘤组阳性表达率明显低于后两组,差异均有统计学意义(P<0.01),后两组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。在卵巢浆液性囊腺癌、黏液性囊腺癌及子宫内膜样癌中的阳性表达率分别为78.8%(26/33)、44.4%(8/18)、36.4%(4/11),浆液性囊腺癌癌组分别与后两者比较,差异均有统计学意义(P<0.05),而后两者间比较,差异无统计学意义(P>0.05,);早期卵巢癌(Ⅰ、Ⅱ期)组织中表达阳性率(41.7%),明显低于晚期卵巢癌(Ⅲ、Ⅳ期)组织中表达阳性率(73.1%)(P<0.05);高分化者阳性率为40%(8/20),明显低于中、低分化者阳性率71.4%(30/42) (P<0.05)。2 KLK8在上皮性良性卵巢肿瘤、交界性卵巢肿瘤及卵巢癌病人的组织中阳性表达率分别为25%(5/20)、27.3%(3/11)及66.1%(41/62),卵巢癌组阳性表达率明显高于前两组,差异均有统计学意义(P<0.05),前两组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。在卵巢浆液性囊腺癌、黏液性囊腺癌及子宫内膜样癌中,阳性表达率分别为87.9%(29/33)、50%(9/18)、27.3%(3/11),前者分别与后两者比较,差异均有统计学意义(P<0.05),而后两者间比较,差异无统计学意义(P>0.05);早期卵巢癌(Ⅰ、Ⅱ期)阳性表达率为83.3%(20/24),明显高于晚期卵巢癌(Ⅲ、Ⅳ期)阳性表达率55.3%(21/38) (P<0.05);高分化者阳性表达率为85%(17/20),明显高于中、低分化者阳性表达率57.1%(24/42) (P<0.05)。3在上皮性良性卵巢肿瘤、交界性卵巢肿瘤及卵巢癌病人的血清中,hK6的表达水平分别为3.24±0.19、3.88±0.22、4.49±0.19(μg/L);hK8表达水平分别为4.26±0.29、5.26±0.46、6.59±0.15(μg/L);CA125表达水平分别为18.58±16.45、36.22±15.24、146.78±110.62, KLK6、KLK8、CA125表达水平在三组间均有差别,差异均有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。经LSD-t检验两两比较,KLK6在卵巢良性肿瘤组表达水平均低于后两组,差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05),后两组比较,卵巢癌组表达水平高于交界性卵巢肿瘤组,差异有统计学意义(P<0.01);KLK8卵巢癌组表达水平均高于前两组,差异均有统计学意义(两者均P<0.01),前两组比较,差异无统计学意义(P>0.05);CA125在良性肿瘤组表达水平均低于后两组,差异有统计学意义(P<0.05),后两组比较,卵巢癌组表达水平高于交界性卵巢肿瘤组,差异有统计学意义(P<0.05)。4卵巢癌组织中KLK6、KLK8表达的A值分别为145.2±11.3、156.4±14.7,与血清浓度值之间均呈显著正相关关系, Spearman等级相关系数分别为0.31(P<0.05)、0.608(P<0.001)。5根据给定的阳性标准,hK6、hK8、CA125用于卵巢癌诊断的敏感度分别为66.1%、61.3%、69.4%,特异度分别为83.9%、77.4%、69.4% ,三者敏感度和特异度比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:1卵巢癌组织及血清中存在KLK6、KLK8蛋白表达升高。二者蛋白表达的改变与卵巢癌临床病理分期和恶性度有关,可作为一项监测卵巢癌病人预后的指标。在卵巢癌的进展过程中,KLK6表达升高,提示预后不佳,KLK8表达升高,提示预后良好。2卵巢癌病人血清hK6及hK8水平与卵巢癌组织中KLK6及KLK8的表达水平有关。3 KLK6、KLK8参与上皮性卵巢癌的发生发展过程,血清hK6、hK8与CA125联合检测可指导卵巢癌的早期诊断及判断化疗疗效。4 KLK6、KLK8由于其本身结构、分布与代谢的特殊性,使它们可能成为卵巢癌新的血清学肿瘤标志物,同时为上皮性卵巢癌的靶向治疗提供新的靶点。
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