树麻雀VEGF基因克隆及其在不同组织、不同海拔的表达量研究

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血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)能促进动物生理及病理状态下血管生成,维持血管正常功能,诱导内皮细胞分裂,增加血管通透性,是动物体内重要的生长因子。本实验以树麻雀为研究对象,利用分子生物学方法克隆树麻雀VEGF基因开放阅读框核苷酸序列,并对VEGF mRNA在树麻雀各组织内的表达量进行比较分析。此外,还比较青藏高原和低海拔区树麻雀肝脏内VEGF表达量的差异性,主要研究结果如下:(1)树麻雀VEGF开放阅读框内核苷酸序列为651bp,与鸟类中鹌鹑和家鸡的同源性均为97%,与爬行类有鳞目不同种类的同源性为69-94%,与硬骨鱼类、两栖类、哺乳类相比,不存在同源性。(2)树麻雀VEGF氨基酸序列由216个氨基酸组成,分子量为30668.161Da,等电点为9.775,与鸟类中家鸡和原鸽的同源性分别为97%、98%,与硬骨鱼类斑马鱼同源性为55%,与两栖类热带爪蟾和非洲爪蟾的同源性分别为67%、68%,与爬行类有鳞目不同种类同源性为64-78%,与哺乳类不同种类同源性为63-77%。VEGF氨基酸序列在脊椎动物不同类群之间存在一定的保守性,说明在脊椎动物中特定功能基因的进化具有保守性和趋同性。(3)树麻雀肝脏中VEGF mRNA表达量显著高于肾脏、脑、肺,心脏中VEGFmRNA表达量显著高于脑、肺,性腺中VEGF mRNA表达量显著低于肝脏、肾脏、心脏、脑、肺。实验结果表明VEGF mRNA表达量与代谢能力有关,与器官的生长状态相关。(4)低海拔区树麻雀肝脏VEGF mRNA表达量显著高于青藏高原区,青藏高原鸟类如何在VEGF基因和蛋白水平适应低氧环境的生理机制有待于进一步研究。
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