β防御素是一类在动物机体先天免疫中发挥作用阳离子抗菌肽,在动物附睾中部分β防御素优先表达。它们构成了保护精子免受外界微生物侵袭的特殊防御系统,而且对精子的成熟、贮存及受精能力的维持具有重要作用。目前,公山羊繁殖系统β防御素表达模式仍不清楚。因此,本研究采用转录组测序技术探寻山羊附睾头中β防御素的种类和表达模式,探究附睾各区段中β防御素的表达特点;筛选附睾头中高表达β防御素,探究其对山羊附睾上皮细胞功能的影响。结果如下:试验一:对7日龄太行山羊睾丸、24月龄山羊睾丸和附睾头转录组测序结果分析显示,三种组织中分别表达有7、12和32种β防御素。7日龄山羊睾丸、24月龄山羊睾丸和附睾头表达量最高的β防御素依次是gBD123、gBD 119和gBD 124;成年山羊睾丸特异性表达gBD33,附睾头特异表达有21种β防御素;山羊β防御素分子量在6.89～13.85 kDa,为小分子、极性、带正电荷、疏水性的强碱性多肽;山羊β防御素蛋白序列均含有高度保守6个半胱氨酸,基本结构-C-X2～4,5-C-X3～6-C-X3～13-C-X4～7-CC-,其中 24种β防御素结构为-C-X5,6-C-X3,4-C-X9-C-X5,6-CC-;有16种β防御素是分泌型糖蛋白;除gBD126外,其余的β防御素蛋白均存在磷酸化位点,推测其可能发挥信号分子的作用。试验二:对太行山羊附睾和输精管共9个区段转录组测序结果分析,与参考基因组数据库相比,共获得新基因8,412个,有32种β防御素表达,附睾头1区（EH1）段中gBD 124表达量最高;分为4个基因簇,分别定位在8、13、23和27号染色体上,不同物种之间其β防御素在染色体上排列顺序具有一定保守性。32个β防御素基因差异表达模式不同。琼脂糖电泳结果显示27号染色体的gBD 104～109tr2在繁殖器官特异性表达。定位在13号染色体上17个基因中gBD 123～126、128和131在30种组织中均有表达,其余的β防御素是在繁殖器官特异性表达。定位在23号染色体上的gBD110～114是在繁殖器官中高度表达,这些高度表达在附睾中的β防御素除了发挥免疫保护功能外,还可能在精子成熟和贮存中发挥作用。试验三:gBD 124的qRT-PCR表达谱分析表明,除背最长肌外,gBD 124在18月龄公山羊睾丸及附睾各段、心、肝、脾、肺和肾均表达,且附睾头表达量极显著高于其它组织（P<0.01）;睾丸gBD 124表达量6月龄时显著高于其它月龄;附睾头、附睾体和附睾尾gBD124表达量随月龄的增加呈上升趋势;7日龄羔羊睾丸和附睾gBD124表达量不存在显著差异（P>0.05）;3、4、5、6、18月龄时附睾头gBD124表达量极显著高于睾丸、附睾体和附睾尾（P<0.01）;免疫荧光定位技术分析显示:gBD 124在公山羊睾丸和附睾中均有分布,但主要在附睾头上皮细胞中表达;其表达量由高到低为:附睾头>附睾体>附睾尾>睾丸,该结果与qRT-PCR表达趋势相符,这说明gBD 124在附睾头中有重要作用。试验四:gBD 124基因过表达细胞模型研究表明,gBD 124显著提高了附睾头上皮的细胞因子IL-1β和CCL5基因表达（P<0.05）,对IL-1α的表达无显著影响（P>0.05）。推测其在附睾头中发挥着免疫保护作用。山羊附睾头中表达有32 种β防御素,是具有-C-X2～4,5-C-X3～6-C-X3～13-C-X4～7-CC-基本结构的阳离子小肽。32种β防御素分为4个基因簇,分别定位在8、13、23和27号染色体,且具有一定序列保守性,位于同一染色体上的β防御素具有相似表达模式。gBD124是附睾头高度表达的β防御素,定位在附睾头上皮细胞中,在附睾上皮细胞的可发挥免疫保护作用,仍需进一步研究其在促精子成熟中作用。