单核细胞亚群在视神经脊髓炎中的变化及糖皮质激素对其的影响

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背景:单核细胞作为重要的固有免疫细胞,具有明显的异质性,根据细胞表面CD16分子表达水平,分为经典型亚群(CD14++CD16-)、中间型亚群(CD14++CD16+)和非经典型亚群(CD14+CD16++),促炎细胞因子IL-1β和TNF-α为非经典型亚群分泌的主要细胞因子。CD16+亚群较CD16-亚群具有更强的促炎作用,其在多种炎性疾病,尤其是自身免疫性疾病中出现明显扩增,分泌的促炎细胞因子IL-1β和TNF-α增加,因而认为其在自身免疫性疾病的发病过程中具有重要作用。视神经脊髓炎(NMO)是中枢神经系统(CNS)自身免疫性疾病,活化的单核细胞是最先到达CNS炎症部位的免疫细胞之一,促炎细胞因子IL-1β和TNF-α参与了NMO发生的病理过程。但目前单核细胞三个亚群在NMO中的变化情况及常规的NMO治疗药物糖皮质激素对单核细胞亚群的影响尚有待阐明。目的:研究单核细胞三亚群(经典型、中间型和非经典型)在NMO患者中的变化情况,探讨其在NMO发病中的可能作用机制。进一步观察糖皮质激素冲击治疗对单核细胞亚群分布的影响,为应用针对单核细胞及其细胞因子的治疗方法治疗NMO提供理论依据。方法:本研究纳入20例急性期NMO患者,以15例健康体检者及10例非炎症性中枢神经系统疾病(NIND)患者为对照;NMO患者分别于糖皮质激素冲击治疗前及冲击治疗结束时行EDSS评分。通过对外周血单个核细胞进行CD14及CD16鼠抗人单克隆抗体染色,流式细胞仪检测,根据单核细胞上CD14和CD16的表达情况,将单核细胞分为三个亚群:CD14++CD16-(经典型)、CD14++CD16+(中间型)和CD14+CD16++(非经典型),从而获得单核细胞三个亚群所占百分比数据。实时荧光定量PCR检测单核细胞IL-1β、TNF-αmRNA表达及ELISA方法检测血浆及脑脊液中IL-1β、TNF-α含量。分析比较各组之间在上述指标之间的差异性及相关性。使用SPSS17.0软件包进行统计学处理。结果:NMO患者较正常对照组单核细胞非经典型亚群及中间型亚群明显扩增,而经典型亚群则明显减少;糖皮质激素治疗后NMO患者单核细胞非经典型亚群出现显著减少,中间型亚群比例无明显变化,而单核细胞经典型亚群则明显增加;NMO患者治疗后EDSS评分较治疗前EDSS评分有显著改善:单核细胞非经典型及经典型亚群治疗前后的变化与治疗前后EDSS评分改善呈正相关,而中间型亚群变化则与EDSS改善无相关性;治疗前NMO患者,单核细胞IL-1β、TNF-α mRNA相对表达及血浆、脑脊液IL-1β、TNF-α水平升高,经糖皮质激素冲击治疗后均较治疗前下降;治疗前NMO患者IL-1β、TNF-α mRNA相对表达与非经典型单核细胞亚群比例呈正相关,与中间型单核细胞亚群及经典型单核细胞亚群比例无相关性。NMO患者治疗前后血浆IL-1β、TNF-α变化与EDSS评分改善呈正相关。结论:1、NMO患者CD16+单核细胞比例增高,CD16-单核细胞比例减少,存在CD16+/CD16-单核细胞比例失衡;2、急性期NMO患者非经典型单核细胞亚群增高可能通过增加IL-1β、TNF-α的表达与分泌,参与NMO疾病的发生;3、糖皮质激素冲击治疗可通过抑制单核细胞非经典型亚群的扩增及IL-1β、 TNF-α的表达分泌,纠正CD16+/CD16-单核细胞失衡,发挥对NMO的治疗作用。
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