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下肢慢性溃疡,即溃疡超过一个月仍未愈合,是一种常见的外科疾病,发病率为0.12-1.1%,其中60岁以上发病率为0.5-3%,80岁以上则高达5%。目前可分成血管源性溃疡、糖尿病足溃疡、压力性溃疡、创伤性溃疡、神经营养性溃疡、恶性溃疡等。其中血管性溃疡可分为慢性静脉性溃疡与慢性动脉性溃疡。当下肢重症缺血时,下肢动脉严重狭窄或闭塞导致局部血液供应不良产生一系列病理生理反应,最终产生静息痛、缺血性溃疡甚至坏疽。合适的敷料可为伤口提供一种最适“微环境”,除具有良好的吸收渗液能力外,还应具有抗菌、止痛和促进伤口愈合的能力。壳聚糖具有抗感染、止血、诱导组织修复和细胞增殖等特性,可作为一种理想的伤口敷料。一、壳聚糖及其复合物治疗大鼠下肢缺血性溃疡的实验研究目的:建立动物模型,模拟人体下肢缺血状态。将壳聚糖复合物与生理盐水纱布应用于动物模型,将两组愈合面积及愈合率进行比较,分析两种材料的促愈效果。探讨壳聚糖复合物对缺血性溃疡愈合的影响及相关因子的表达。方法:扬州大学比较医学中心提供健康、同龄、雄性无特殊病原体SD大鼠60只,体重200-230g/只。麻醉后,腹股沟做斜形切口,显微镜下游离出右髂外动脉、股动脉、膝下腘动脉及相关动脉分支,结扎并离断。术后大鼠分笼饲养,观察2日发现部分大鼠出现下肢跛行、发绀;部分大鼠出现下肢坏死。挑选下肢缺血但并未出现下肢坏死的大鼠30只;右足碘伏消毒,应用皮肤活检钻孔器造直径5mm,深度1mm创面,建立大鼠下肢缺血性溃疡模型。把壳聚糖生物护伤喷膜功能敷料均匀喷涂于实验组溃疡创面,对照组生理盐水喷涂,每日一次,连续14天。术后3、5、7、14天摄片,应用Image J图像软件,将两组愈合面积及愈合率对比分析,取术后不同天数溃疡组织行免疫组化,检测血管内皮细胞生长因子、白细胞介素-2、肿瘤坏死因子、内皮型一氧化氮合酶及碱性成纤维细胞生长因子蛋白的阳性表达。结果:实验组溃疡面积明显小于对照组,在3、5、7、14天实验组愈合率明显优于对照组(实验组3天66.71±2.01、5天78.12±1.24、7天89.24±1.15、14天100±0.00;对照组3天54.29±3.26、5天64.53±2.55、7天71.13±1.44、14天82.81±1.95),P<0.05,差异有统计学意义。提取不同天数的溃疡组织对血管内皮细胞生长因子、白细胞介素-2、肿瘤坏死因子、内皮型一氧化氮合酶及碱性成纤维细胞生长因子行免疫组化检测。结果提示血管内皮细胞生长因子(实验组205.32±29.38,对照组151.52±16.29)、碱性成纤维细胞生长因子(实验组290.53±45.63,对照组199.86±17.31)阳性表达高,P<0.05,差异有统计学意义。结论:壳聚糖及其复合物可促进下肢缺血性溃疡创面的愈合,其促愈机制可能在于壳聚糖具有诱导组织修复和细胞增殖、促进血管新生等。目前大部分体外实验及临床应用均提示在治疗糖尿病足溃疡方面有良好应用前景。本研究应用动物试验对比研究,发现壳聚糖及其复合物通过促进血管内皮细胞生长因子、碱性成纤维细胞生长因子的表达,促进下肢缺血性溃疡的愈合。二、壳聚糖及其复合物治疗下肢缺血性溃疡的临床研究目的:探讨壳聚糖敷料与传统换药对下肢缺血性溃疡的治疗效果,为今后下肢缺血性溃疡的治疗起到指导作用。方法:2019年5月至2020年1月按标准选入病人30例,年龄40-85岁。实验组采用壳聚糖复合物伤口敷料,对照组选用普通纱布敷料。对选入病人的年龄、性别、合并疾病等一般资料进行比较,并应用SPSS19.0分析其是否有统计学意义;摄片后应用Image J图像分析软件观察7、14、21、28天溃疡面大小、愈合率;将灭菌棉签放置于溃疡底部,标记其与皮肤平行处,所得出的长度即为溃疡深度,单位为毫米(mm);病人的疼痛度通过VAS评分量表评估。结果:共有30例患者完成临床试验,经过统计学分析实验组与对照组在年龄、性别、合并疾病等方面,P>0.05,差别无统计学意义。实验组在用药后14、21、28天的溃疡愈合率优于对照组(实验组14天41.0±19.0、21天62.0±18.0、28天79.0±20.0,对照组14天29.0±31.0、21天48.0±21.0、28天60.0±22.0),P<0.05,差异有统计学意义。实验组第14、21、28天溃疡深度优于对照组(实验组14天4.27±3.13、21天3.35±2.26、28天2.11±1.68,对照组14天4.71±1.79、21天3.91±1.64、28天3.01±1.63),P<0.05,差异有统计学意义。实验组7、14、21、28天VAS评分低于对照组(实验组,7天2.98±1.05、14天2.50±1.44、21天2.19±1.01、28天1.84±1.14;对照组7天3.71±1.09、14天3.61±1.05、第21天3.31±1.16、28天2.91±1.12),P<0.05,差异有统计学意义。结论:壳聚糖及其复合物敷料能为缺血性溃疡创面提供一种“最适微环境”,有效促进缺血性溃疡愈合,同时还能适当减轻患者的疼痛感,具有良好的临床应用价值。