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目的从蛋白和基因水平研究漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)的Bcl-2、C-myc蛋白表达及Bcl-2/IgH融合基因和C-myc基因扩增的情况,并结合分子亚型、临床因素和预后情况进行统计学分析,以明确Bcl-2、C-myc与DLBCL亚型、临床预后的相关性及其意义。方法1.收集并筛选出临床资料完整的70个初治的DLBCL病例标本,应用免疫组织化学EnVision二步法标记LCA、CD45RO、CD3、CD20等蛋白,以确定目的细胞为B细胞来源的肿瘤细胞。2.免疫组化标记CD10、Bcl-6、MUM-1蛋白,按Hans等的分型方法将病例分成生发中心B细胞型(GCB型)和非生发中心B细胞型(non-GCB型)两组。3.对所有患者进行随访,记录生存状况。4.免疫组化标记Bcl-2和C-myc蛋白,Real-time PCR技术检测Bcl-2/IgH融合基因及C-myc基因扩增的情况,并与临床因素及预后做相关性分析。结果1.70例DLBCL中GCB亚型25例(35.7%),non-GCB亚型有45例(64.3%),GCB亚型的生存率高于non-GCB亚型(P=0.027)。2.Bcl-2蛋白阳性表达的共有47例(67.1%),Bcl-2蛋白阳性患者与阴性患者间的生存率无显著差异(P=0.054),但在non-GCB亚型中Bcl-2阴性病例生存率要高于阳性病例(P=0.045);另外,Real-time PCR检测出12个病例组织中有Bcl-2/IgH基因融合现象,这些病例均属于GCB亚型,占全组GCB型的48.0%,Bcl-2/IgH基因融合与Ann Arbor分期的相关性有显著统计学意义(P=0.003),Ann Arbor分期Ⅲ～Ⅳ期患者肿瘤组织中的Bcl-2/IgH融合基因的ΔCt值要明显低于Ⅰ～Ⅱ期患者(P=0.008),且Bcl-2/IgH基因融合阳性患者预后不良(P=0.020)。3.C-myc蛋白阳性表达的共有61例(87.1%),细胞核阳性组和细胞浆阳性组间的生存率有统计学差异(P=0.036),C-myc胞浆阳性患者的生存率较低,且与Ann Arbor分期有显著相关性(P=0.003);19个病例中有C-myc基因的扩增,占全组DLBCL的27.1%,C-myc基因扩增与生存率无相关性但与C-myc蛋白表达区域有显著相关性(P=0.001),另外,Real-time PCR结果显示Ann Arbor分期Ⅲ～Ⅳ期患者的C-myc基因的ΔCt值低于Ⅰ～Ⅱ期患者(P=0.012);C-myc胞核阳性患者C-myc的ΔCt值明显高于胞浆阳性患者(P=0.007)。结论1.GCB亚型的DLBCL预后要好于non-GCB型,对DLBCL进行亚分型有利于预后的判断和治疗方案的选择。2.在non-GCB亚型中检测Bcl-2蛋白表达情况,在GCB亚型中检测Bcl-2/IgH融合基因拷贝数,能够进一步的完善预后判断及临床分期,有助于为患者制定合理的治疗方案。3.C-myc蛋白阳性表达区域和C-myc基因扩增的检测均有助于临床分期。