桑籽发芽过程中1-脱氧野尻霉素的变化及乳汁抗蚜虫研究

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桑树乳汁是一种由桑树乳汁管分泌的特殊物质。它含有蛋白质、糖、脂肪、生物碱等。桑树中的1-脱氧野尻霉素(DNJ)是一种能高效抑制α–葡萄糖苷酶活性、治疗糖尿病的天然产物。它主要存在于桑叶、桑枝和桑根中,在桑树种子中也有一定量的DNJ,具有重要的研究价值。多数研究主要针对桑树的根、茎、叶等器官中的DNJ的提取与测定,但对桑树生长发育过程中DNJ含量的变化规律研究较少。本论文以桑籽作为实验材料,对桑籽到幼苗发育过程中DNJ的变化及桑树乳汁抗蚜虫的特性进行了研究分析,为桑树乳汁的形成规律以及以桑树为材料的生物抗虫研究打下基础。DNJ含量测定是采用柱前衍生化反相高效液相色谱-紫外检测法(RP-HPLC-UV)。桑籽催芽处理,在28~32℃的光照培养箱中培育,待长出两片子叶时开始分离根、茎、叶,置常温下使其干燥。以65%的乙醇为溶剂提取桑苗、桑树干种子、浸泡后的种子和刚发芽的种子中的DNJ,9-芴甲基氯甲酸甲酯(FMOC-Cl)为衍生剂,在pH=8.5的硼酸钾缓冲液中在20℃下进行衍生化反应20min,生成具有紫外吸收的衍生物DNJ-FMOC。以乙腈-0.1%醋酸(55:45,V/V)为流动相,流速为1.0mL/min,柱温为25℃,荧光检测器激发波长为254nm的RP-HPLC-UV法测定DNJ-FMOC含量。实验结果显示:衍生物DNJ-FMOC的色谱峰分离效果好,DNJ-FMOC的峰面积与DNJ浓度呈线性关系。RP-HPLC-UV法测定桑苗中DNJ含量可以作为桑树组织和相关药物中DNJ含量测定的有效方法。用RP-HPLC-UV法测定以65%的乙醇为溶剂提取的桑苗根、茎、叶、桑树干种子、浸泡后的种子和刚发芽的种子中DNJ的含量,结果发现桑树中DNJ含量有很大差异,种子中DNJ含量较高,随着种子的发育直至发芽后,DNJ含量逐渐减少,之后增加并趋于稳定。用RP-HPLC-UV法测定分别以65%的乙醇和0.05mol/L HCl为溶剂提取桑苗叶片和茎中的DNJ,结果发现用65%乙醇提取的叶片和茎中的DNJ含量均高于用0.05mol/L HCl提取的叶片和茎中DNJ含量。用徒手切片和石蜡切片法观察桑树的结构及乳汁管的分布情况,结果表明,桑树中的乳汁管是无节乳汁管,在桑树的根、茎、叶中均存在乳汁管,主要分布在皮层和韧皮部,且在各器官的分布数量有差异。采用内吸法、浸叶法、浸虫法来测定不同浓度的桑树乳汁对蚜虫的抗性作用。发现当乳汁浓度为20%时蚜虫的死亡率为最高。结果表明:桑树乳汁对蚜虫有较强的触杀作用,处理时间越长,蚜虫的死亡率越明显;桑乳汁浓度越高对蚜虫影响越大。
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固体超强酸是近年来研究和开发的一种新型固体酸催化剂。它克服了工业上传统液体酸催化剂易腐蚀、难分离、运输和保管困难、污染环境等诸多弊端,对很多重要的化学工业品的合成表现出了较好的催化活性、较高的选择性和较好的重复使用性能。在固体超强酸催化剂中复合金属氧化物型固体超强酸因在酸强度、热稳定性、耐溶剂性、催化活性和环境保护等方面表现优异而成为固体超强酸催化剂中的重点研究对象。首先采用恒pH共沉淀法制备了一