血必净注射液对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护作用

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目的:研究血必净注射液对大鼠肝缺血再灌注损伤的保护作用并进一步探讨其可能机制,为扩展其临床用途提供实验依据。方法:108只SD大鼠,随机分为假手术组(A组36只)、对照组(B组36只)、实验组(C组36只)。实验组大鼠给予血必净注射液lOmL/kg,腹腔注射,1次/日,连续给药3天,(期间大鼠常规喂养给水,12h照明)第4天手术,手术前30min再给予同量血必净注射液。对照组给予生理盐水,剂量与方法同实验组。假手术组开腹后仅翻动肠管,开腹后30min关腹。Pringle’s法建立肝脏缺血再灌注模型,缺血30min后去除血管夹恢复肝脏血流。每组分别于再灌注2h、6h、12h,按上述时相点每组随机选择12只大鼠,取静脉血及肝脏组织。在BeckmanDXC800全自动生化分析仪上,测定血清中的ALT、AST、LDH。用免疫组织化学法检测肝脏组织Bax、Bc1-2、Caspase-3的表达。TUNEL法检测肝细胞凋亡结果:灌注后2、6、12小时,各组指标比较:C组、B组与A组比较,ALT、AST、LDH均增高(P<0.05);C组与B组比较,则降低(P<0.05)。C组Bax蛋白表达低于B组(P<0.05),与A组比较差异无显著性(P>0.05),而B组Bax蛋白表达高于A组(P<0.05);B组Bcl-2蛋白表达高于A组(P<0.01),且C组Bcl-2蛋白表达也高于A组(P<0.01),C组与B组,两组之间比较差异无显著性(P>0.05);B组Caspase-3蛋白表达高于C组(P<0.05),且高于A组(P<0.05),C组与A组之间比较差异无显著性(P>0.05);TUNEL法检测肝细胞凋亡:B组明显高于C组(P<0.01),且明显高于A组(P<0.01),C组明显高于A组(P<0.01)。术后假手术组的肝组织病理表现基本正常;对照组随着灌注时间的延长,肝脏组织病理改变逐渐加重,出现不同程度的肝淤血、肝窦结构破坏、肝细胞变性及坏死;实验组的肝脏病理改变较对照组有所好转。结论:血必净注射液可能通过降低Bax/Bcl-2的比例,降低Caspase-3蛋白的表达,进一步抑制细胞的凋亡,发挥对肝脏缺血再灌注损伤的保护作用。
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