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第一部分亚慢性B[a]P暴露对SD大鼠海马中SNAP-25及Glu R的影响目的:通过建立苯并[a]芘（Benzo（a）pyrene,B[a]P）所诱导的动物神经毒性模型,观察其对SD大鼠海马组织中谷氨酸（glutamate,Glu）含量的改变及对突触小体相关蛋白（Synaptosome-associated proteinof25 k Da,SNAP-25）、谷氨酸受体（glutamate receptor,Glu R）表达的影响,为揭示SNAP-25及Glu在B[a]P所致神经毒性中所扮演的重要作用提供理论依据。方法:80只雄性SD幼鼠,日龄5天,随机分为溶剂对照组、B[a]P低剂量组（0.02 mg/kg）、B[a]P中剂量组（0.2 mg/kg）和B[a]P高剂量组（2.0 mg/kg）,按分组及其体质量连续灌胃处理7周,溶剂对照组给以等量花生油处理。染毒结束后采用Morris水迷宫检测大鼠学习记忆能力;采用1H-磁共振波谱法（1H-MRS）检测Glu在相关脑区的代谢参数;电镜观察海马组织神经元、突触及细胞超微结构等变化。分别于染毒1周及7周末,分离海马组织,并采用免疫组化法及Western-blot测定海马组织中SNAP-25及谷氨酸受体（glutamate receptor,Glu R）的表达情况。结果:（1）当B[a]P处理35天后,B[a]P处理组老鼠体重较对照组明显下降,尤以0.2和2.0 mg/kg组下降明显,差异具有统计学意义[F（3,76）=3.881,P=0.008];（2）Morris水迷宫显示,B[a]P处理组较溶剂对照组逃避潜伏期及游泳距离增加,而跨平台次数及在目标象限停留时间显著减少;（3）电镜结果示,B[a]P暴露组较溶剂对照组海马组织内质网和胞浆肿胀、扩大,形态不规则,海马组织中突触间隙明显增宽;（4）1H-MRS结果显示,与对照组（0.996±0.236 ppm）相比,随着染毒浓度的增加,海马中Glu的含量呈下降趋势（各染毒组分别为0.722±0.185,0.687±0.172和0.583±0.154 ppm）;（5）与溶剂对照组相比,B[a]P暴露1周及7周后,海马组织中Glu R 1及Glu R 2表达均明显降低,而SNAP-25表达增加。结论:B[a]P亚慢性暴露可引起新生幼鼠学习记忆能力缺陷,改变海马组织的超微结构,其可能的神经毒作用机制在于通过降低Glu水平而改变Glu的传输,降低Glu R的表达,增强SNAP-25的表达。第二部分SNAP-25及Glu R在B[a]P诱导神经毒作用机制的研究目的:探讨B[a]P对U87细胞活性及凋亡的影响,并通过观察改变SNAP-25蛋白的表达后其对Glu R表达的影响。方法:采用MTT法观察B[a]P对U87细胞活性的影响;并通过AO-EB染色法、Hoechst 33258染色法及annexin V-FITC/PI双染法进一步观察B[a]P对U87细胞的凋亡情况;B[a]P染毒后,采用Fluo-3 AM荧光探针检测细胞内[Ca2+]i含量;通过si RNA转染技术抑制SNAP-25蛋白的表达后,采用Western-blot及RT-PCR进一步观察其对Glu R的影响。结果:（1）B[a]P染毒24 h后,U87细胞的细胞活性明显降低,呈明显的剂量-反应关系;（2）AO-EB染色法、annexin V-FITC/PI双染法结果显示B[a]P暴露组较对照组细胞凋亡率明显增加,差异具有统计学意义（P<0.05）;Hoechst 33258染色法显示,B[a]P暴露组部分细胞核固缩,染色质浓集,致密浓染,呈强蓝色荧光;（3）流式细胞术示,U87细胞各细胞周期比例（G0/G1:56.04%±2.78%;G2/M:12.44%±2.71%;S:9.05%±0.79%）较对照组（G0/G1:56.44%±2.44%;G2/M:11.79%±3.66%;S:8.57%±0.36%）无明显改变;（4）B[a]P可显著增加细胞内[Ca2+]i浓度;（5）下调SNAP-25蛋白表达后,细胞内Glu R 1和Glu R 2在m RNA及蛋白水平较B[a]P处理组明显增加。结论:B[a]P可降低细胞活性、引起细胞凋亡。通过下调SNAP-25的表达,细胞内Glu R水平增加,表明B[a]P的神经毒性作用至少部分归因于SNAP-25表达的改变,进而影响Glu神经递质传递。