丁香酚对链格孢霉的抑制作用及其在蓝莓保鲜中的应用

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蓝莓果实酸甜可口,营养丰富,是具有较高经济价值和研究开发前景的新型经济型小浆果。但由于蓝莓果实柔嫩且果皮较薄,采摘时正值高温多雨,除出现机械损伤外,果蒂易出现伤痕,极易受到微生物的侵染而发生腐烂变质,从而降低蓝莓的商品价值。本文以“灿烂”蓝莓果实(采自南京市溧水区白马镇)为研究对象,对自然条件下导致其腐烂变质的菌种进行分离鉴定并确定优势腐败菌,对比不同处理方式对链格孢霉生长和蓝莓保鲜效果的影响;通过研究丁香酚对链格孢霉的抑制机理及对蓝莓的保鲜效果,以期为开发绿色、健康、便捷的保鲜方式提供理论参考。主要研究内容如下:(1)通过组织分离法从腐烂蓝莓中分离得到11株腐败真菌,根据菌株在PDA上的菌落特征和分子生物学信息进行鉴定,这11株菌分别属于6个属:稻黑孢霉(Nigrospora oryzae),青霉(Penicillium sp.),芽枝孢霉(Cladosporium sp.),链格孢霉(Alternaria sp.),葡萄汁有孢汉逊酵母(Hanseniaspora uvarum)和美极梅奇酵母(Metschnikowia pulcherrima)。经致病性检验,确定链格孢霉为蓝莓采后的主要腐败菌。(2)以菌落直径和腐烂率为指标,评价不同冷杀菌技术对链格孢霉生长和蓝莓保鲜效果的影响。结果表明:生物保鲜剂、低温等离子体、高功率脉冲微波在一定程度上均能抑制链格孢霉的生长,其中丁香酚抑制效果最为显著(P<0.05),菌落直径仅为32.90 mm。丁香酚、低温等离子体和高功率脉冲微波处理蓝莓后,与对照组相比,腐烂率均分别下降了31.25%、25.00%和18.75%。(3)以链格孢霉(Alternaria sp.)为供试菌株,研究丁香酚对链格孢霉菌丝生长、孢子萌发、细胞膜和细胞壁的影响。结果表明:丁香酚浓度为0.3 mg/m L时能够完全抑制链格孢霉菌丝的生长及孢子萌发;扫描电镜(SEM)和透射电镜(TEM)观察显示,经0.30 mg/m L丁香酚处理的链格孢霉菌体严重变形、表面出现大量褶皱,胞内物质流失,无完整细胞器;碘化丙啶(PI)染色出现红色荧光;胞外可溶性蛋白含量和电导率分别提高1.18和8.02倍;几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶的活性分别提高70.37%和33.33%。丁香酚主要是破坏链格孢霉细胞壁,改变细胞膜通透性,进而抑制链格孢霉的生长代谢及其繁殖,从而发挥抑菌活性。(4)以蓝莓为试验材料,研究丁香酚对蓝莓采后保鲜的影响。分别采用浓度为0、2、4、6、8和10μL/L的丁香酚熏蒸蓝莓,定期检测相关指标。结果表明:不同浓度丁香酚熏蒸能有效降低蓝莓的腐烂率,尤以熏蒸浓度为8μL/L时效果最佳。与对照组相比,8μL/L的丁香酚熏蒸可减少蓝莓贮藏期间果实表面微生物的数量,腐烂发生时间延迟2~3 d,贮藏10 d后腐烂率降低7.50%,可滴定酸(TA)和可溶性固形物(TSS)含量增加了和0.20%和0.23%,花色苷含量增加0.28 mg/g,总酚和类黄酮出现了峰值,较好的维持了营养品质另外,多酚氧化酶(PPO)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)的活力较对照组分别提高了82.71%、33.94%、23.68%和50.57%,且有效抑制了丙二醛含量的上升。研究结果表明丁香酚熏蒸处理对蓝莓具有一定的防腐保鲜效果。
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