重组人源前列腺特异性抗原(rPSA)-hFc融合蛋白在昆虫细胞中的表达与研究

来源 :中国科学院研究生院(上海生命科学研究院) | 被引量 : 0次 | 上传用户:jiangyuer
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近年来,数以千计的不同种类蛋白已经成功利用昆虫细胞表达系统进行表达,其中包括多种蛋白酶,细胞表面蛋白。昆虫细胞表达出的蛋白具有较好的空间构型,糖基化修饰,并且表达量也相对较高,因此利用昆虫细胞表达系统表达出的蛋白,被广泛用在蛋白质功能、蛋白质相互作用的研究中,并在产品开发中被用于制备高效疫苗。在以往前列腺特异性抗原(PSA)检测试剂盒中,标准品通常是由天然蛋白纯化而来,但这种标准品存在诸多缺点,如批次间稳定性差,不利于纯化得到单一形式蛋白,纯化成本较高等等,为了解决这些问题,本实验利用昆虫细胞表达系统Bac to Bac表达重组前列腺特异性抗原。为方便纯化提高重组前列腺特异性抗原的稳定性,使用人源IgG2的Fc片段融合PSA进行表达。实验中,在昆虫细胞中表达并纯化出的PSA-Fc融合蛋白,标准品的替代实验证明重组PSA可以有效替代PSA国际标准品,本实验为前列腺特异性抗原诊断试剂盒的标准品替代奠定了基础。
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