目的:三味干姜散作为传统藏方,已应用于肝脏疾病的治疗,实验研究也表明其对各种肝损伤模型有保护作用,本论文基于肝肠相关理论,研究其对肠道微生态的影响。建立菌群失调联合肝损伤小鼠模型,观察三味干姜散对肝脏和肠道的调节作用;复制菌群失调小鼠模型,观察三味干姜散对肠道的影响;复制肝损伤大鼠模型,观察不同肝损伤病程肠道微生态的改变,进一步探讨肝肠相关理论,以及三味干姜的调节作用。方法:1.三味干姜散对菌群失调联合肝损伤小鼠肝脏和肠道的影响。在连续3天灌胃克林霉素后,给予三味干姜散7d,末次给药后1h皮下注射10%CCl4油溶液,16h后测定血清中肝功能酶ALT、AST的活力,同时在不灌胃克林霉素的前提下皮下注射10%CCl4复制肝损伤模型进行对比;HE染色法观察肝肠组织病理学变化;16Sr DNA测序法检测肠道菌群主要菌属的变化情况。2.三味干姜散对头孢曲松钠诱导的菌群失调小鼠肠道功能的影响。自由饮用0.5mg/m L头孢曲松钠溶液5d,复制菌群失调模型,连续给予三味干姜散7d取材,扫描电镜观察肠组织结构;16Sr DNA测序法检测肠道菌群主要菌属的变化情况。3.三味干姜散对CCl4诱导的肝损伤大鼠一般情况及肝脏功能的影响。采用40%CCl4油溶液皮下注射诱导慢性肝损伤模型,2次/周,共8周,造模第3周开始灌胃给予三味干姜散及阳性药（水飞蓟素、培菲康）,分别在给药2周、4周、6周后进行取材。每周记录大鼠的体重,观察大鼠的毛色、饮水、进食量及活跃程度。通过肝脏指数、血清中ALT、AST水平、肝脏病理组织检查,观察三味干姜散对肝损伤模型的治疗效果。4.三味干姜散对CCl4诱导的肝损伤大鼠肠道微生态的影响。通过HE染色观察末端回肠组织;免疫组化法检测肠组织紧密连接相关蛋白Occludin和ZO-1表达。通过16Sr DNA测序法检测大鼠肠道菌群的结构和多样性。5.三味干姜散对CCl4诱导的肝损伤大鼠Nrf2解毒信号通路的影响。通过ELISA法动态检测肠匀浆中LPS、TNF-α的含量。运用微板法检测肝脏总胆汁酸含量,Western-Blot法检测肝组织中Nrf2及其下游解毒酶NQO1、HO-1,胆汁酸外排转运体BSEP蛋白的表达情况。结果:1.三味干姜散对菌群失调联合肝损伤小鼠肝脏和肠道的影响。与正常组比较,肝功酶结果显示,菌群失调组、肝损伤组血清中ALT、AST显著升高（P<0.01）,联合模型组ALT、AST水平显著升高（P<0.01）;肝肠HE结果显示联合模型肝脏肝索结构紊乱,肝小叶细胞核消失或固缩,肠黏膜出现水肿;与联合模型组比较,三味干姜散可明显下调血清ALT、AST水平,恢复肝索结构,减轻肝细胞水肿,改善肠黏膜水肿及炎性浸润。16Sr DNA结果显示,门水平下,与正常组比较,菌群失调组变形菌门（Proteobacteria）水平显著上升（P<0.05）,联合模型组柔壁菌门（Tenericutes）水平显著上升（P<0.05）;与联合模型组比较,三味干姜低剂量可以显著下调变形菌门、厚壁菌门的水平（P<0.01）。属水平下,与正常组相比,菌群失调组、联合模型组拟杆菌属（Bacteroides）、Parabacteroide丰度显著上升（P<0.05或P<0.01）;与联合模型组比较,三味干姜散及培菲康作用后,Parabacteroide水平显著下降（P<0.01）。2.三味干姜散对头孢曲松钠诱导的菌群失调小鼠肠道功能的影响。模型组肠绒毛呈扁平状,排列稀疏,局部绒毛有断裂、倒伏,杯状细胞结构破坏,三味干姜散高剂量和培菲康治疗后,肠绒毛形态变的饱满,排列紧密、整齐,可见杯状细胞。与正常组相比,模型组肠球菌属（Enterococcus）、Robinsoniella的相对含量显著上升（P<0.05或P<0.01）。与模型组相比,三味干姜散组肠球菌属（Enterococcus）、Robinsoniella的相对含量显著下降（P<0.01）。3.三味干姜散对CCl4诱导的肝损伤大鼠一般情况及肝脏功能的影响。各组大鼠体重随时间的延长有所增加,正常组增长最快,模型组增长最慢。肝脏指数结果显示,模型组随时间的延长显著增大（P<0.05）,和模型组相比三味干姜散作用后随时间的延长未见明显变化。模型组ALT、AST水平随时间的延长升高,ALT变化更明显。三味干姜散作用后ALT、AST水平随时间的延长显著降低（P<0.05）。不同时间段模型组肝组织均出现肝小叶结构紊乱,炎性细胞浸润、气球样病变,随着造模时间的延长,肝细胞脂肪变性,肝小叶坏死程度加深,出现核固缩或消失,肝小叶完全被破坏,可见肝小叶中央静脉周围纤维组织明显增多。三味干姜散作用后可一定程度改善肝组织的炎性细胞浸润及纤维化程度,随着给药时间的延长药物对肝损伤的改善程度逐渐提高。4.三味干姜散对CCl4诱导的肝损伤大鼠肠道微生态的影响。各时间点模型组肠组织均出现肠黏膜上皮水肿、绒毛倒伏或脱落,肠间隙变大,随着造模进程的推进,呈现加重趋势。三味干姜散作用后,能改善回肠组织黏膜水肿及绒毛脱落现象。模型组紧密连接蛋白ZO-1、Occludin随造模时间的延长阳性表达量逐渐减少,三味干姜散作用后,可显著上调阳性表达量。16Sr DNA结果显示模型组物种丰度下降,多样性减少,三味干姜散治疗后物种多样性升高;门水平上,模型组厚壁菌门（Firmicutes）水平显著下降（P<0.05）,拟杆菌门（Bacteroidetes）水平显著升高（P<0.05）,与模型组相比,三味干姜散作用后,放线菌门水平显著下降（P<0.05）,厚壁菌门水平显著上升（P<0.05）。属水平上,模型组乳杆菌属（Lactobacillus）水平显著降低（P<0.05）,拟杆菌属（Bacteroides）、粪球菌属（Coprococcus）、瘤胃球菌属（Ruminococcus）、萨特氏菌属（Sutterella）水平显著升高（P<0.05或P<0.01）,与模型组比较,三味干姜散作用后可显著上调乳杆菌属（P<0.05或P<0.01）的水平（P<0.05）,显著下调拟杆菌属、粪球菌属、瘤胃球菌属、萨特氏菌属水平（P<0.05或P<0.01）。5.三味干姜散对肝损伤大鼠Nrf2解毒信号通路的影响。模型组LPS、TNF-α含量随时间的延长显著升高（P<0.01）;模型组Nrf2表达显著降低（P<0.01）,下游解毒酶HO-1、NQO1表达显著升高（P<0.01）;模型组肝脏总胆汁酸含量显著升高（P<0.01）,胆汁酸外排转运体BSEP表达显著下降（P<0.05）。三味干姜散作用后LPS、TNF-α水平下降;Nrf2、NQO1表达显著升高（P<0.05或P<0.01）;肝脏总胆汁酸含量显著降低（P<0.05）,BSEP表达显著增多（P<0.05）。结论:1.三味干姜散能改善菌群失调联合肝损伤小鼠模型的肝损伤程度及菌群失调水平,三味干姜散具有保肝和调节肠道菌群的双重作用。2.三味干姜散能改善菌群失调小鼠肠道病理及肠道菌群比例失调,三味干姜散具有调节肠道功能的作用。3.三味干姜散能减轻不同肝损伤病程肝脏功能、肠道病理、肠道上皮屏障的损害程度,下调肠道LPS、TNF-α水平;减轻慢性肝损伤大鼠肝脏胆汁淤积,调节慢性肝损伤大鼠肠道菌群的结构和多样性,三味干姜散具有保肝和调节肠道微生态的作用。4.三味干姜散对肠道微生态的调节作用可能是通过影响Nrf2解毒功能,上调解毒酶水平,增强胆汁外排转运体BSEP的表达,减轻肠道LPS、TNF-α的蓄积。