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目的:通过X射线致中国仓鼠卵巢(CHO)细胞DNA损伤及其细胞凋亡的剂量效应关系研究,探讨电离辐射的生殖毒性机制,为辐射所致遗传效应提供一些有价值的资料。 方法:用2~20GyX射线照射CHO细胞株,通过~3H-TdR掺入法检测CHO细胞DNA损伤;用荧光显微镜、Annexin V/PI双染色法结合流式细胞仪检测和观察细胞凋亡及其形态学改变。 结果:(1)X射线照射不仅抑制了~3H-TdR掺入CHO细胞DNA,而且呈现明显的剂量依赖关系。照射后24和48小时,DNA合成抑制仍然存在,但到48小时,抑制已减少,而且出现DNA合成恢复的趋势。 (2)X射线照射后不管是24小时,还是48小时或72小时均出现细胞凋亡,而且随着照射剂量增加,凋亡细胞数亦增加。但照后48小时和72小时细胞凋亡更为明显(P<0.05),且照射后三个时相中,细胞凋亡峰值均出现在照射剂量为16Gy。 (3)X射线照射后凋亡的CHO细胞经PI染色、在荧光显微镜下观察到细胞核内染色质的不规则聚集、核固缩和周边化,有的呈月牙形,甚至出现凋亡小体等一系列凋亡细胞形态特征。 结论:(1)X射线照射引起CHO细胞DNA损伤与照射剂量相关,随照射剂量增加而增加。 (2)X射线照射引起的DNA损伤由于不能修复,最终导致CHO细胞凋亡。CHO细胞凋亡滞后于其DNA损伤。(3)辐射诱导生殖细胞凋亡,是机体主动清除潜在危险,保持遗传稳定性的一种有效的反应。