论文部分内容阅读
乳汁寡糖是乳汁中丰度较高的游离低聚糖,具有抗感染、增强免疫力、促进大脑发育、提高认知力等功能。对不同来源、不同泌乳时期的乳汁寡糖组进行定性定量比较分析,可为合理选择优质乳汁资源提供糖组学方面的依据。但由于寡糖结构复杂及分析条件的限制,这些方面的研究尚不够系统深入。本文以不同来源的乳汁为材料,采用醇沉法提取乳清寡糖,经C18和石墨碳固相萃取小柱除杂后,用PMP衍生化标记,以二糖GalAraPMP2为内标,采用电喷雾电离质谱(ESI-MS)、串联质谱(MS/MS)和在线亲水作用色谱-电喷雾电离质谱联用(HILIC-MS)技术,对不同来源、不同泌乳时期的乳汁寡糖进行定性定量比较分析。结果如下：1.经ESI-MS分析表明,人乳共有13种寡糖组成,猪、牛、羊均为9种,其中H2F, H2A, H3N, H3NF, H3NF2, H4N2, H4N2F这7种寡糖组是四种哺乳动物所共有的。2.通过HILIC-MS和MS/MS分析,人乳寡糖组中H2F, H3NF2, H4N2F, H4N2F2, H4N2F3, H5N3F分离鉴定出2个同分异构体,H3NAF有3个同分异构体。猪乳寡糖组中H2F和H2A有2个同分异构体。羊乳寡糖组中H2F和H3NF2有2个同分异构体。在四种哺乳动物中都分离出了H2F2,只在猪乳寡糖中分离出了H3NA。3.随着泌乳期的推移,人乳寡糖在结构多样性和表达量方面都逐渐增加,猪乳寡糖则逐渐降低。人乳和猪乳都是岩藻糖化的寡糖比例逐渐升高,唾液酸化的寡糖比例逐渐降低。4.对于四种不同来源的常乳来说,共发现25条寡糖链,寡糖组成为16种：H2F, H2A, H2F2, H3N, H2NA, H3NF, H3NF2, H4N2, H3NAF, H4NF2, H4N2F, H3NA2, H4N2F2, H5N3, H4N2F3, H5N3F。人乳寡糖22条,丰度(样品寡糖含量与内标比值)为17.69；猪乳寡糖11条,丰度为2.66；羊乳寡糖11条,丰度为0.71；牛乳寡糖5条,丰度较低为0.25。其中羊乳和人乳寡糖都是H3N和H3NF所占比例较大,且羊乳和人乳寡糖都为高岩藻糖化低唾液酸化寡糖组。