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苦瓜(Momordicacharantia.L)是一种常见的瓜类蔬菜。本文以苦瓜的自交系为材料,比较了植物生长物质、基因型和外植体等因素对愈伤组织的诱导、不定芽和不定根的分化的影响,从而建立了苦瓜离体植株再生体系。现将主要的研究结果报道如下:
1.苦瓜无菌苗的获得
用三种方法对苦瓜种子进行灭菌处理,将处理后的种子接种在MS和1/2MS培养基上获得无菌苗。结果表明,种子去壳洗净浸泡5min,用70%酒精泡lmin,洗净后0.1%HgCI2消毒lOmin的灭菌效果最好。MS培养基和1/2MS培养基上的种子发芽率没有差异,暗培养5天,对提高种子的发芽率没有作用。
2.苦瓜离体植株再生体系的建立
通过多因子正交试验,筛选出苦瓜自交系MC42愈伤组织诱导最优水平组为培养基为:MS+ZT2mg/L+IBA0.1mg/L,外植体为子叶。MS+6-BAlmg/L+IBA0.03mg/L,外植体为子叶。苦瓜自交系MC9愈伤组织诱导最优水平组为培养基为:MS+ZTlmg/L+IBA0.05mg/L,外植体为上胚轴。MS+6-BA3mg/L+IBA0.02mg/L,外植体为子叶。通过愈伤组织诱导不定芽没有取得成功。
以MS+ZT4.5mg/L+KTl.Omg/L作为培养基不经过愈伤组织,用外植体直接诱导获得了不定芽,不定芽诱导率最高可达13.3%。以上胚轴作为外植体有利于提高不定芽诱导率。
用苦瓜子叶节进行诱导不定芽效果最好,最高的诱导率达到100%。最佳的培养基是MS+6-BA2mg/L+IBA0.02mg/L。
基本培养基I/2MS比MS更利于MC9的生根。苦瓜自交系MC9生根诱导最适培养基为1/2MS+IBA0.2mg/L。