论文部分内容阅读
苏麻是传统的药食同源植物,富含多种营养物质。贵州苏麻种质资源丰富,种植广泛。研究发现,贵州苏麻籽实的油脂含量为30%左右,其中α-亚麻酸(ALA)的含量高达60%左右。ALA的缺乏是老年痴呆、癌症、心脑血管疾病、高血压、高血脂和糖尿病等疾病发生的重要诱因。最近研究表明:ALA以及其长链代谢物,可能在许多生理活动中起着重要的作用,如益智、保护视力、降血脂、降血压、抗血栓形成、延缓衰老、抗过敏及抑制癌症的发生和转移等作用。本文用两种不同方法对苏麻籽油中ALA进行分离纯化,并初步探索了ALA的护肝作用,主要研究结论如下:以单因素实验方式考量蒸馏温度、预热温度、转数、进料速率四个因素对分子蒸馏纯化效果的影响,并在此基础上进行响应面优化实验。响应面最佳工艺条件为:蒸馏温度100℃、预热温度70℃、转数235 r/min,进料速率0.9 mL/min,此时重组分收集瓶中ALA纯度为83.01%。为得到高品质、高纯度的ALA,又进行了以控制蒸馏温度为主的多级蒸馏试验,经过4级蒸馏,将产品中ALA纯度提高到86.04%。通过超声波辅助HP-β-CD包合的方法来对贵州苏麻油中ALA进行分离纯化,考虑超声的功率、超声时间和料水比(无水乙醇+FFA与HP-β-CD溶液的比值)三个因素对ALA纯度的影响,并在此单因素基础上进行响应面优化设计。结果表明,最佳提取工艺为超声功率250 W,料液比1:7.5、提取时间21 min,此条件下ALA的纯度为87.11%。进行动物实验,连续灌胃小鼠一个月酒精和分子蒸馏工艺提取的不同纯度的ALA,分析小鼠血清中载脂蛋白、抗炎免疫因子和肝脏中抗氧化酶的相关指标。结果表明,ALA的干预显著降低血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、碱性磷酸酶(AKP)和总胆红素水平,能有效促进载脂蛋白的合成分泌,抑制肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素(IL-6)和NO的释放,提高SOD和GSH活力。86%左右的ALA解酒保肝效果最佳,其作用机制为防止甘油三酯和胆固醇代谢紊乱,抗炎、抗氧化途径。用不同纯度的ALA灌胃小鼠10天,之后再单次静脉注射刀豆蛋白A。通过测定血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST)和肿瘤坏死因子(TNF-α)、干扰素-γ(IFN-γ)和IL-6水平监测肝损伤。测定肝组织中MDA、SOD、GSH、MPO等水平判断ALA对刀豆蛋白A引起免疫肝损伤小鼠的保护作用,并探索其药理作用机制。研究表明,ALA对小鼠ConA诱导的肝损伤有保护作用,作用机制是减少促炎细胞因子,恢复氧化还原平衡,从而减少肝细胞和组织损伤的信号。通过分子蒸馏技术和超声波辅助羟丙基-β-环糊精包合法对苏麻油中ALA进行分离纯化,探索出了两种提纯苏麻油中ALA的新方法。再用分子蒸馏方法提纯的不同纯度ALA来探索其对酒精肝损伤、刀豆蛋白A肝损伤小鼠的保护作用,发现ALA(尤其是高纯度)在解酒保肝和预防免疫肝损伤上具有很大潜力。