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背景和目的:越来越多的研究表明微小RNA(micro RNA,miRNA)可以靶向调控多种肿瘤相关基因的表达,在肿瘤的发生发展过程中发挥重要作用。miRNA-205(miR-205)已被证实与多种肿瘤发生相关,但其在不同肿瘤中的异常表达和作用不同,既可作为抑癌基因也可作为癌基因参与不同类型肿瘤的发病过程。有文献报道鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)组织中miR-205表达上调,提示miR-205可能与NPC发病有关,但miR-205在NPC发生发展中的具体作用和机制尚未明确。本研究旨在通过体内和体外实验,探讨miR-205-5p在NPC中的作用及机制,为进一步明确miR-205-5p参与NPC的作用机制提供依据。方法:采用q RT-PCR检测40例NPC组织和22例鼻咽炎组织中miR-205-5p的表达水平。将人工合成的Hsa-miR-205-5p模拟物(mimics)和抑制物(inhibitor)及相应阴性对照瞬时转染NPC细胞系HONE1,q RT-PCR检测转染细胞中miR-205-5p的表达水平。对上述转染及对照细胞采用CCK-8检测细胞增殖,Annexin V-FITC和PI双染及流式细胞术检测细胞凋亡,细胞划痕及Transwell小室检测细胞迁移,基质胶(Matrigel)Transwell小室检测细胞侵袭。通过软件预测miR-205-5p靶基因,选择可能的靶基因抑癌基因PTEN(phosphatase and tensin homolog)和Smad4,采用q RT-PCR和western blot检测两种基因及PTEN下游基因蛋白激酶B(protein kinase B,AKT)在miR-205-5p mimics、inhibitor转染细胞及对照细胞中的转录和蛋白表达水平。结果:(1)与鼻咽炎组织比较,NPC组织中miR-205-5p的表达水平升高,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)与对照细胞比较,miR-205-5p mimics转染细胞中miR-205-5p显著过表达,而miR-205-5p inhibitor转染细胞中miR-205-5p显著下调。(3)miR-205-5p mimics转染细胞CCK-8吸光度值、细胞划痕闭合率、Transwell小室迁移细胞数及基质胶侵袭细胞数均高于对照细胞,而miR-205-5p inhibitor转染细胞4种指标均低于对照细胞,差异均有统计学意义(P<0.05)。与对照细胞比较,miR-205-5p mimics和miR-205-5p inhibitor转染细胞细胞凋亡率和顺铂诱导细胞凋亡率均无显著变化(P>0.05)。(4)与对照细胞比较,PTEN和Smad4的转录水平和蛋白表达水平在miR-205-5p mimics转染细胞中下降,在miR-205-5p inhibitor转染细胞中升高,差异均有统计学意义(P<0.05);AKT的转录水平和总蛋白表达水平无明显改变(P>0.05),但与对照细胞比较,miR-205-5p mimics转染细胞中磷酸化AKT(p-AKT)蛋白表达水平升高,miR-205-5p inhibitor转染细胞中p-AKT表达水平下降,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:(1)miR-205-5p在NPC组中表达上调,其过表达促进NPC细胞系HONE1增殖、迁移和侵袭,而表达下调抑制NPC细胞系增殖、迁移和侵袭,提示miR-205-5p作为癌基因在NPC的发生和发展中起作用。(2)miR-205-5p可能通过靶向调控抑癌基因PTEN/AKT通路及抑癌基因Smad4的表达促进NPC细胞增殖、迁移和侵袭。