稻曲病是稻曲病菌Villosiclava virens特异性侵染水稻花丝而引起的真菌病害。近年来,随着超级稻和杂交水稻的大面积种植,稻曲病从一个轻微病害逐渐发展成为一个水稻主要病害。稻曲病不仅会导致水稻减产,稻曲球含有的稻曲毒素也严重影响稻米的食用安全。近年来,稻曲病菌菌核已经被证明是稻曲病发生的一个重要初侵染源。因此,进一步明确菌核的越冬行为及筛选对其具有降解作用的生防菌将对稻曲病的综合防控具有重要价值。同时,本文也探索了稻曲病菌菌核形成相关基因的功能分析的技术与方法。试验结果如下:1、菌核越冬模拟试验发现,次年5月菌核完成越冬后,土壤表面的菌核20%发生解体,而埋在土壤表面下2 cm处的菌核70%发生解体。对越冬后形态完好的菌核进行萌发培养,10天后菌核萌发,表面产生绒状的黄色菌丝。10-20天后黄色菌丝向上伸长形成子实体原基。20-40天后,子实体不断伸长,开始形成头状子座。40-60天后,子实体生长至2-4 cm,颜色由黄色变为黄绿色。90天后,子实体完全黑化。萌发结果显示,土壤表面越冬菌核约有30%萌发产生子实体,埋在土壤表面下2 cm处越冬菌核约有6.67%萌发产生子实体。因此,土壤表面的菌核成功越冬率为30%,埋在土壤表面下2 cm处的菌核成功越冬率为6.67%。结果表明,菌核能够在田间安全越冬,作为初侵染源。2、分离稻曲病菌菌核和鹅观草麦角病菌菌核表面的腐生真菌,筛选出10株候选菌株。对菌株进行功能验证,结果发现分离自稻曲病菌菌核表面的菌株JH-5在10天内迅速定殖在菌核表面,30天内菌核彻底软化,30-60天菌核腐烂失去萌发活性。其他候选菌株虽可以定殖在菌核表面,但对菌核没有明显的降解效果。菌株的rDNA-ITS序列比对和形态学观察表明,菌株JH-5是绳状篮状菌（Talaromyces funiculosus）。透射电镜观察发现,生防菌JH-5的作用机制类似于重寄生作用,其菌丝可进入菌核组织细胞从而破坏菌核组织的完整性。3、在低温诱导菌核形成的转录组数据中,用倍数分析对照组与处理组基因表达水平差异,在上调数据中初筛出差异显著的6个基因。分别为Uv8b-1535（protein kinase domain-containing protein）、Uv8b-5068（beta-galactosidase）、Uv8b-6995（eliciting plant response-like protein）、Uv8b-7484（glutathione s-transferase）、Uv8b-7491（FAD dependent oxidoreductase）、Uv8b-7023（regulatory P domain-containing protein）。结合同源重组技术,引入CRISPR载体,对相关基因进行敲除。通过PEG介导的原生质体转化,制备出的原生质体浓度为107个/mL。结果共得到45个转化子,40个为易位转化子,没有得到敲除突变体。将长出的转化子进行转接培养发现有些易位插入突变体的产孢量和菌丝密度明显增加。