链霉菌139(Streptomyces sp.139)能分泌一种新型胞外多糖依博素(Ebosin)，药效学研究表明其在体内具有明显的抗类风湿性关节炎作用，有可能发展成为新型药物。 依博素的生物合成基因簇(ste)已被克隆和鉴定，它包含27个完整的开放阅读框架(stel—ste27)。本实验室已对其中多个重要功能基因进行了深入研究，本文的研究对象为ste8、ste9和ste15基因。 生物信息学分析表明ste8基因的编码产物含有链长决定蛋白Wzz结构域，Wzz结构域参与脂多糖的生物合成并起着链长决定的作用。为了确定该基因在依博素生物合成中的功能，采用基因同源重组双交换的策略对ste8进行了基因的敲除，获得了ste8基因阻断株Streptomyces sp.139(ste8)。和依博素相比，基因阻断株产生的多糖EPS—8m中岩藻糖、木糖和葡萄糖含量降低明显；对IL-1R拮抗活性显著降低。出现了两个不同分子量的新多糖，Mp分别为40.03×104和2.57×104，显著低于依博素分子量，基本验证了ste8在依博素生物合成中对多糖链长起控制作用。 根据基因同源性分析，ste9基因的编码产物含有链长决定蛋白Wzz的结构域，可能对多糖链长也起决定的作用。采用同前方法获得了ste9基因阻断株Streptomycessp.139(ste9—)。基因阻断株产生的多糖EPS—9m中岩藻糖、木糖和葡萄糖含量降低明显。部分IL-1R拮抗活性丧失。也出现了两种新多糖，Mp分别为41.85×104和1.4061×104，均明显低于依博素的分子量，说明ste9在依博素生物合成中对多糖链长也起控制作用。 对ste8和ste9进行了基因双敲除，EPS8—9m中岩藻糖、木糖和葡萄糖降低比较明显；对IL-1R的拮抗活性较低。EPS8—9m含两个不同分子量的新多糖，Mp分别为41.37×104和1.4×104，均大大低于依博素，结果进一步确定了ste8和ste9在依博素生物合成中对多糖链长起控制作用。 为研究Ste15的生物化学性质，在大肠杆菌中成功克隆表达了ste15基因，采用连续偶联分光光度法，确定了该蛋白为葡萄糖糖基转移酶，该酶能从UDP—葡萄糖转移葡萄糖至细胞膜的葡萄糖接受体，在依博素生物合成中重复单元增长链的延长中起重要作用。 本研究首次确定了ste8和ste9在依博素生物合成中对多糖链长起主要作用。获得的依博素新衍生物将为多糖结构与活性关系研究奠定基础，并可能对新多糖药物发展起推动作用。