目的：　　目前关于HBeAg的研究多集中在临床分析，对肝癌细胞及其微环境的影响及作用机制的研究较少，利用慢病毒载体技术构建HBeAg基因稳定表达的HepG2肝癌细胞株，鉴定转染后细胞中HBeAg的表达，研究HBeAg的表达对HepG2细胞增殖、迁移、侵袭能力的影响。　　方法：　　参照GenBank中人HBeAg基因序列化学合成目的基因片段，构建携带HBeAg基因序列的慢病毒载体，依靠慢病毒转染技术将HBeAg基因转染进入HepG2细胞基因组，通过嘌呤霉素筛选和单克隆培养获得转染细胞株，使用RT-qPCR、Western blot技术检测转染后细胞HBeAg的转录和翻译水平，IFMA法检测细胞上清液中HBeAg的表达。CCK-8实验、克隆形成实验，Transwell小室实验检测转染后细胞增殖、迁移及侵袭能力的变化。并于传代培养3个月后检测转染细胞株HBeAg mRNA和蛋白表达水平、细胞生物学特性有无明显变化。　　结果：　　成功构建携带HBeAg基因序列的慢病毒载体，慢病毒产物测序结果与GenBank数据库中HBeAg序列对比同源性为100％。使用慢病毒转染HepG2细胞，经嘌呤霉素筛选获得转染HepG2细胞株，实验证明:　　(1)RT-qPCR实验验证细胞可表达HBeAg mRNA。　　(2)Western blot实验检测到细胞产生HBeAg蛋白。　　(3)IFMA法检测细胞上清液结果HBeAg阳性。　　(4)CCK-8实验和克隆形成实验验证细胞增殖能力下降(P＜0.01）。　　(5)Transwell实验验证细胞迁移、侵袭能力下降(P＜0.01）。　　细胞株传代培养3个月后HBeAg mRNA和蛋白表达水平、细胞生物学特性均无明显变化。　　结论：　　本实验构建了搭载HBeAg基因的重组慢病毒载体，用慢病毒转染HepG2细胞后，HepG2细胞可有效表达HBeAg基因，转录翻译生成HBeAg蛋白，并且可以将HBeAg分泌到细胞外，成功构建稳定表达HBeAg的肝癌细胞株。体外实验证实，稳定表达HBeAg后HepG2肝癌细胞的增殖、迁移及侵袭能力均受到抑制。