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柑桔是世界第一大果树，其种植面积、产量均居首位。中国是柑桔原产国之一，柑桔生产面积居世界第一，产量世界第二，是仅次于苹果的第二大水果产业。柑桔病害是制约柑桔生产的一个重要因素，如何防治其病害己成为一个重要的研究课题。本研究于2004年7月至2006年4月在广东省农科院果树研究所重点实验室进行，以柑桔衰退病、碎叶病、裂皮病、黄龙病和溃疡病为研究对象，建立了分别检测这五种病害的RT-PCR体系，并探讨了多重RT-PCR检测方法，以期获得快速、准确检测柑桔病害的方法。获得的主要研究结果如下： 1．建立了柑桔衰退病、碎叶病的RT-PCR检测体系；并根据裂皮病为环状类病毒，GC含量达到59.5％，通过选用特异Taq酶和添加PCR增强剂来提高PCR扩增效率，建立了柑桔裂皮病的RT-PCR检测体系。 2．首次RT-PCR检测柑桔黄龙病和溃疡病，并筛选出能在同一退火温度下进行PCR扩增的各病害特异引物，实现了五种病害的同步化检测。 3．在柑桔黄龙病和衰退病RT-PCR检测体系的基础上，建立了同时检测这两种病害的二重RT-PCR检测体系。得出适合二重PCR体系的Taq酶浓度为0.05U／μl；dNTPs浓度为0.25mmol／L；Mg2+为1.5mmol／L；两引物的浓度为HLB 0.30μmol／L、CTV 0.15 μmol／L；退火温度为63℃。 4．本研究首次以oligo（dT）引物为反转录，运用PCR检测出具有ployA加尾的柑桔衰退病和碎叶病；发现不具有ployA加尾的柑桔裂皮病同样可以用oligo（dT）反转录的RT-PCR检测出，通过测序分析，其同源性在96％以上，并发现在CEV序列中有一个富含A的区段。在此基础上结合二重RT-PCR体系，进一步研究了同时检测CTV、CEV和CTLV的多重RT-PCR检测体系。