腹水和血浆动态循环肿瘤DNA监测在腹腔热灌注化疗中的临床意义

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背景:腹腔热灌注化疗(Hyperthermic Intraperitoneal Chemotherapy,HIPEC)是腹膜癌(Peritoneal Carcinomatosis,PC)患者的主要治疗方法。然而,预测HIPEC的疗效仍然是一个主要问题。因此,我们需要一种微创、准确的预测生物标志物。许多研究证实,循环肿瘤DNA(Circulating Tumor DNA,ct DNA)可以准确预测各种实体瘤的疗效和预后。目的:探索腹水和动态血浆ct DNA监测在HIPEC中的临床价值。方法:在这项观察性研究中招募了19例PC患者,PC患者均由细胞学以及病理学所证实。他们自愿接受HIPEC治疗且签署知情同意书。其中主要排除标准包括严重心肺疾病、急性肠梗阻等HIPEC禁忌症。每位患者均行1周期HIPEC治疗(即2周内行4次HIPEC,每次间隔3天),灌注用药为雷替曲塞、多西他赛以及奥沙利铂。腹水样本在基线期进行采集,血浆样本分别在基线期以及HIPEC治疗后两个时间节点进行采集。连续血浆样本在2个时间点(基线期、HIPEC治疗后)进行下一代测序(Next-Generation Sequencing,NGS)以及基因突变分析。首先,我们利用分子肿瘤负荷指数(Molecular Tumor Burden Index,m TBI)作为ct DNA的平均值,并且以主克隆等位基因突变频率(Variant Allele Frequency,VAF)以及同时期常见肿瘤标志物如癌胚抗原的变化作为对照。其次,利用每位患者VAF的总和(Su m-VAF)代表整体肿瘤负荷。以上血浆指标变化值均与患者预后进行Spearman相关性分析。此外,我们利用19例患者基线期m TBI的中位数(0.67)为临界值进行分组,分为高m TBI组(≥0.67,N=10)以及低m TBI组(<0.67,N=9)。据此利用Kaplan-Meier法进行了m TBI高组以及m TBI低组患者的生存差异分析。基线期腹水样本同样进行NGS检测,并与基线期血浆样本检测结果进行比对,筛选出共同突变基因并记录VAF值。最后,通过腹水和血浆共同突变基因的VAF分析二者突变的一致性。结果:(1)m TBI、Sum-VAF的下降程度与腹水无进展生存期(Progression-Free Survival,PFS)呈显著正相关(R=0.673,P=0.023;R=0.945,P<0.001),均强于主克隆VAF下降值(R=0.588,P=0.057)和同期肿瘤标志物下降值(R=0.091,P=0.790)与预后的相关性。(2)低m TBI组患者腹水PFS(中位腹水PFS,7.20个月;95%CI:5.23–8.77)比高m TBI组患者的腹水PFS(中位腹水PFS,2.46个月;95%CI:1.50-4.12;HR 0.157,95%CI:0.046–0.540,P=0.003)更长。在OS中有类似的结果,低m TBI组患者的OS(中位OS,11.38个月;95%CI:9.23–13.13)显著高于高m T BI组患者的OS(中位OS,4.97个月;95%CI:3.24-10.00;HR 0.296,95%CI:0.109–0.804,P=0.017)。(3)血浆和腹水中具有较高一致性的基因突变(R=0.794,P=0.001)。结论:实时连续血浆ct DNA检测能够准确反映肿瘤负荷,且△m TBI和△Su m-VAF可作为HIPEC治疗PC患者的疗效预测生物标记物,其准确性显著高于主克隆VAF以及同期肿瘤标记物。基线期高m TBI(≥0.67)或许是预后的危险因素。腹水以及血浆的基因突变一致性较强。
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