ECHS1基因在肝癌细胞迁移中的作用及其机制研究

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背景和目的:肝细胞癌(Hepatocellular carcinoma,HCC)是一种发病率高、病程短、且生存率极低的恶性肿瘤,占肿瘤致死病因的第二位,仅次于肺癌。大部分肝癌患者就诊时已发现肝癌浸润和转移,严重影响预后和生存,目前尚无有效的治疗肝癌的方法,近年来分子基因靶向治疗恶性肿瘤成为医学研究热点。本课题主要探索烯脂酰辅酶A水合酶短链1(Short chain enoyl-CoA hydratase,ECHS1)对肝癌细胞迁移能力的影响及其相关机制。方法:首先应用RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术构建稳定干扰ECHS1基因的肝癌细胞株HepG2和Huh7,Western Blot检测其干扰效果。随后应用细胞划痕实验和Transwell实验检测ECHS1干扰后的两组肝癌细胞迁移情况。为探索其相关机制,RT-PCR检测比较HepG2细胞干扰组和对照组中细胞迁移相关的多种基因mRNA相对表达量,最后利用Western Blot方法研究细胞迁移相关蛋白的表达水平。结果:成功构建了两组干扰ECHS1表达的肝癌细胞株HepG2和Huh7(HepG2-si ECHS1及其对照细胞株HepG2-p U6、Huh7-siECHS1及其对照细胞株Huh7-pLV)),Western Blot验证两组细胞干扰效果显著(P<0.05)。细胞划痕实验和Transwell实验结果显示ECHS1干扰后的肝癌细胞迁移能力减弱。RT-PCR和Western Blot提示肝癌细胞干扰ECHS1后β3-Integrin、p-FAK、p-ERK蛋白表达水平降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:综上所述,ECHS1促进肝癌细胞迁移,并可能通过整合素信号通路进行调控。
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