电针、埋线调整吗啡成瘾小鼠昼夜节律特征及其调控SCN内Per基因表达的研究

来源 :成都中医药大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:xingxing123789
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目的:探讨电针、埋线对吗啡成瘾小鼠自发性活动昼夜节律的调整作用及大脑视交叉上核(suprachiasmatic nucleus, SCN)内周期基因Per1、Per2的表达的变化,以期为电针、埋线治疗药物成瘾的临床应用提供实验依据。方法:筛选出符合实验要求的雄性C57BL/6J近交系小鼠42只,随机分为空白组(Control, n=14)、模型组(Model, n=14)、电针组(EA, electro-acupuncture, n=7)、埋线组(CI, catgut implantation, n=7).动物模型根据“七天递增成瘾法”皮下注射盐酸吗啡注射液(20mg/kg,40mg/kg,60mg/kg,80mg/kg,100mg/kg,100mg/kg,100mg/kg),空白组在相同时间点(8am,8pm)皮下注射等量生理盐水。选取双侧“肾俞”穴(BL23),电针组小鼠每次注射完盐酸吗啡注射液15mmin后,使用韩式穴位神经刺激仪(]HANS-200)电针刺激双侧“肾俞”穴,治疗频率2/15Hz,电流0.2mA,15min/次,2次/日;埋线组小鼠于造模第一天早上8点注射盐酸吗啡注射液15mmin后,将0.5cm铬肠线埋入双侧“肾俞”穴内。第7天上午10点,腹腔注射盐酸纳洛酮注射液催瘾(4mg/kg),密切观察记录1小时内每组小鼠的戒断症状并评分。取小鼠视交叉,采用实时荧光定量PCR法检测SCN内周期基因Per1、Per2的表达水平。结果:(1)行为学结果①戒断评分:空白组小鼠经纳洛酮催瘾后,无明显戒断症状表现,1小时内与平日活动时无异;模型组小鼠催瘾后1小时中,表现异常亢奋,出现戒断症状反应,如跳跃、湿狗样颤抖、腹泻、舔阴、竖尾、体重降低等,其中,跳跃、湿狗样颤抖、腹泻发生率为100%,体重减少值均大于2%,与空白小鼠相比其差异具有统计学意义(P<0.05);电针组小鼠和埋线组小鼠催瘾后1小时内虽不如模型组小鼠亢奋,但同样出现典型戒断症状表现,且分别与空白组、模型组戒断症状评分比较均有统计学意义(P<0.05)。电针组与埋线组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。②七天中体重:实验前每组小鼠间体重无明显差异(P>0.05),造模开始后,空白组小鼠体重无异常,随着时间增加正常波动;模型组小鼠体重七天中明显下降,且七天前后体重差值与空白组相比有统计学意义(P<0.05);电针组小鼠和埋线组小鼠七天内体重均呈下降趋势,与空白组相比差异有统计学意义(P<0.05),与模型组相比分别从第六天、第七天开始有上升恢复趋势,但其差异均无统计学意义(P>0.05);电针组与埋线组相比,其差异无统计学意义(P>0.05)。③昼夜节律:实验前各组小鼠间周期、振幅、活动度比较均无明显差异(P>0.05),实验开始后,空白组小鼠昼夜节律与实验前相比无异常;模型组小鼠具有明显的昼夜节律改变,表现在振幅和活动度与空白组相比具有明显差异(P<0.05),但周期比较无统计学意义(P>0.05);电针后,小鼠振幅及活动度与空白组和模型组相比均有明显改变(P<0.05),但周期比较无统计学意义(P>0.05);埋线后,振幅与空白组和模型组相比均有统计学意义(P<0.05),但周期和活动度无统计学意义(P>0.05);电针组与埋线组相比,其差异无统计学意义(P>0.05)。(2)Per基因表达:与空白组小鼠相比,模型组小鼠SCN内Per1、Per2基因表达均下调,且差异具有统计学意义(P<0.05);电针组小鼠与空白组小鼠相比,Per1、Per2基因表达均有差异(P<0.05),与模型组小鼠相比,Per2基因表达明显上调(P<0.05),但Perl基因表达无明显差异(P>0.05);埋线组小鼠与空白组小鼠相比,Per1、Per2基因表达均有差异(P<0.05),与模型组小鼠相比,Perl基因表达明显上调(P<0.05),但Per2基因表达无统计学意义(P>0.05);电针组与埋线组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结果表明,埋线和电针可以分别调节Per1、Per2基因的表达从而改善吗啡成瘾小鼠紊乱的节律,缓解戒断症状的形成。结论:(1)电针、埋线都可以缓解吗啡成瘾小鼠戒断症状的严重程度,降低戒断症状的评分,减轻吗啡成瘾小鼠体重下降的趋势。(2)电针和埋线可以明显改善吗啡成瘾小鼠昼夜节律的紊乱,电针主要表现在降低振幅和活动度,埋线主要表现在降低振幅。(3) Per1、Per2基因的表达与成瘾行为的形成相关,吗啡成瘾后,可分别通过埋线、电针将基因的表达上调,从而达到缓解戒断症状的目的,电针治疗与埋线治疗差异不明显。
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