目的　　卵巢癌是妇科三大恶性肿瘤之一，其死亡率在女性生殖系统恶性肿瘤中居首位[1]。卵巢癌对化疗药物产生耐药性是患者死亡的重要原因，查明其耐药机制并寻找逆转剂是解决这一问题的有效手段。　　前期的研究显示，铂类药物的原发性耐药可能与PI3K/Akt信号通路异常活化有关。信号转导通路的异常是肿瘤发生、发展的重要条件，PI3K/Akt信号通路与人类多种肿瘤密切相关，在肿瘤细胞的增殖、存活、抵抗凋亡、血管发生、远处转移以及对放化疗抵抗中发挥了重要作用。Ras基因是一种原癌基因，在人类的大部分肿瘤细胞中存在Ras的突变。活化的Ras能直接结合并激活P13K的P110催化亚基，P13K活化后将PIP2转化而生成第二信使PIP3，然后通过激活生存信号激酶PKB/AKT等靶蛋白来调控细胞生存。　　目前有代表性的卵巢癌耐药逆转剂有维拉帕米、环孢菌素A、三苯氧胺等，但是具有较大的毒副作用，在应用上受到了限制。姜黄素（Curcumin）是从中药姜黄中提取的一种相对分子质量小的脂溶性多酚类色素，具有抗炎、抗氧化、抗癌、清除自由基、抗微生物以及对心血管系统、消化系统等多方面药理作用[2]。大部分的研究证明姜黄素在抑制肿瘤细胞的转移、增生和浸润的过程中有多个作用靶点，进一步阐明了其对肿瘤的治疗作用。姜黄素几乎无毒副作用，且来源广，价格低，有着广泛的应用前景。卡铂是临床常用的卵巢癌化疗药。卡铂的剂量限制毒性是骨髓抑制，特别是血小板减少。因此卡铂与其他抗肿瘤药物联合化疗卵巢癌具有一定优势。但是，对顺铂耐药的卵巢癌[3]，卡铂很少奏效。　　为明确卵巢癌耐药机制以及各药物作用在信号通路上的位置靶点，应用具有明确基因型的鼠卵巢癌转基因细胞系T1（基因型:p53-/-，c-myc,K-ras），T2(基因型:p53-/-,c-myc,Akt)，T3(基因型:p53-/-,K-ras,Akt)。前期研究结果表明姜黄素与PI3K抑制剂LY294002联合用药可抑制卵巢癌细胞转基因细胞株T1、T2、T3的生长，促进凋亡，具有协同效应。本实验在前期研究的基础上进一步观察姜黄素与卡铂单独或联合用药对鼠卵巢癌转基因细胞系的影响，并探讨姜黄素对鼠卵巢癌细胞系的抑制作用机制是否与K-ras及PI3K/Akt信号通路有关。　　方法　　体外试验培养转基因细胞株T1、T2、T3，至对数生长期，MTT比色分析法检测卡铂单用、卡铂与姜黄素联合用药24小时对卵巢癌细胞系T1、T2、T3的细胞抑制率。实时定量PCR检测卡铂单用、卡铂与姜黄素联合用药24小时对T1、T2、T3细胞系的中Kras、PI3K、Akt的mRNA表达水平。Westernblotting检测卡铂单用、卡铂与姜黄素联合用药24小时对T1、T2、T3细胞系kras、p-PI3K、p-Akt的蛋白表达水平。SPSS统计分析实验结果。　　实验结果　　1、MTT检测细胞增殖抑制率，鼠卵巢癌转基因细胞系T1、T2、T3对卡铂具有耐药作用，姜黄素与各浓度卡铂联用显著提高了其增殖抑制率，且对含有Akt的T2、T3作用更加明显。　　2、通过RT-PCR检测T1、T2、T3细胞的Kras、PI3K、Akt的mRNA表达量，卡铂姜黄素联用组的表达量低于卡铂单用组。　　3、通过Westernblot检测T1、T2、T3细胞Kras、p-PI3K、p-Akt表达量，卡铂姜黄素联用组低于卡铂单用组。　　结论　　1.鼠卵巢癌转基因细胞系T1、T2、T3对卡铂具有耐药性。　　2.姜黄素可逆转鼠卵巢癌转基因细胞系对卡铂的耐药性，且对含有Akt的T2、T3作用更加明显。　　3.姜黄素逆转卵巢癌对卡铂耐药，可能与抑制Kras、PI3K、Akt的表达有关，也可能直接抑制PI3K/Akt信号通路。