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目的:构建鼠λ2-干扰素(mouse IFN-λ2,mIFN-λ2)的pEGFP真核表达载体,转染至CHO细胞,筛选出稳定表达分泌型mIFN-λ2蛋白的CHO细胞系,并在体外培养的细胞上检测mIFN-λ2蛋白的生物学活性,为进一步研究IFN-λ家族的生物学功能及进行动物体内抗肺癌治疗的研究奠定基础。方法:用人水疱口炎病毒(vesicular stomatitis virus,VSV)刺激小鼠脾脏细胞,用RT-PCR克隆mIFN-λ2全长基因,克隆至测序载体PMD18-T Vector进行基因序列测定,将序列测定正确的mIFN-λ2基因与pEGFP真核表达载体连接,构建pEGFP-mIFN-λ2真核表达载体。将重组体转染至CHO细胞,加入G418筛选出稳定表达mIFN-λ2蛋白的CHO细胞株,收集其分泌的上清在鼠肺癌细胞上进行抗病毒活性测定。结果:PMD18-T-mIFN-λ2,用XhoⅠ和SacⅠ双酶切鉴定,出现582bp大小的带,经基因序列测定与Genebank上公布的mIFN-λ2的序列完全一致。成功构建了pEGFP-mIFN-λ2真核表达载体,并转染至CHO细胞筛选出稳定表达mIFN-λ2的细胞株,RT-PCR检测到CHO-pEGFP-mIFN-λ2细胞株中mIFN-λ2 mRNA的表达。稳定表达mIFN-λ2的CHO细胞株所分泌的细胞上清中的mIFN-λ2蛋白在鼠肺癌细胞上的抗病毒活性为10~4 AU/ml。结论:本研究成功克隆了mIFN-λ2的全长序列,并建立了稳定表达mIFN-λ2的CHO细胞株,其所生产的分泌型mIFN-λ2蛋白在体外培养的细胞上具有明显的抗病毒活性,进而说明我们所表达的mIFN-λ2蛋白具有较高的生物学活性,为进一步研究IFN-λ家族的生物学功能及进行动物体内抗肺癌治疗的研究打下坚实基础。