菌株S15发酵条件、抗生素提取及对白菜黑斑病防治效果的初步研究

来源 :河北农业大学 | 被引量 : 6次 | 上传用户:mm74481
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本文以最小培养基为基础,筛选出适合拮抗链霉菌S15产生抗生素的发酵培养基,并对其摇瓶发酵条件进行了初步研究。研究表明菌株S15的适宜发酵培养基是:葡萄糖2%,淀粉1%,花生饼粉2%,蛋白胨0.3%,硫酸铵0.5%,磷酸二氢钾0.02%,碳酸钙0.4%,硫酸亚铁0.01%硫酸镁0.05%,氯化钠0.3%。其适宜的摇瓶发酵条件是:种龄28h,接种量4%(v/v),摇瓶装量80ml/500ml三角瓶,摇床转速200r/min,发酵温度26℃,初始pH值7,发酵时间84h。 菌株S15发酵液和1%的表面活性剂(熊猫牌洗衣粉)混合后进行的对白菜黑斑病温室防治试验表明,接种前24h喷施发酵原液和发酵液5倍稀释液,对白菜黑斑病有显著的防治效果,其防治效率分别为92.6%和91.5%,与50%多菌灵可湿性粉剂500倍液防治效果没有显著性差异:接种后60h,喷施发酵原液和发酵液5倍稀释液对白菜黑斑病没有防治作用,对照药剂多菌灵500倍液亦无防治效果。 对菌株S15产生的发酵液酸、碱和热稳定性研究表明该发酵液在碱性条件下对热不稳定,pH10时经100℃处理50min后完全丧失活性,而在酸性条件下对热较稳定。对此抗生素分离提取试验表明该抗生素是一种碱性水溶性抗生素。经活性炭动态层析,0.5N硫酸:丙酮(1∶3,v/v)洗脱液洗脱,活性部分经离子树脂D155(铵型)柱层析分离,蒸馏水和0.5%氨水洗涤,2%氨水洗脱后活性部分再经CG-50(铵型)柱层析分离,第四活性部分经高效液相色谱(Sephadex LH-20)分离,并对其主要活性部分进行紫外波长扫描,发现其在200nm-400nm范围内无紫外吸收,只在近紫外端195nm处有一吸收峰。
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