初步分离和鉴定四种肿瘤细胞系的肿瘤干细胞

来源 :昆明理工大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:judy17318
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肿瘤是导致人类死亡的主要原因之一,目前治疗肿瘤的主要措施是手术治疗和抗增殖的治疗方法,但这些治疗方式常常发生不可预测的恶性肿瘤细胞转移,给根治肿瘤带来了障碍。近期发现在肿瘤组织中存在着一小群具有高致瘤能力的细胞,这些细胞可能源自于正常干细胞的转化。越来越多的证据表明,肿瘤的生长与转移需要这一少量的细胞亚群,它们具有干细胞的特征,被称为“肿瘤干细胞”(cancer stem cells,CSC)。目前仅见有关端粒酶阳性的肿瘤中分离肿瘤干细胞,但端粒酶阴性肿瘤中是否也具有肿瘤干细胞在国内外尚未见报道。本研究以三种端粒酶阴性的骨肉瘤细胞系U-2OS、Saos-2和SCID22-3B-1,一种肺癌细胞系XWLC-05为研究对象,利用细胞贴壁、低粘附培养、软琼脂培养以及细胞单克隆培养方法检测细胞的体外增殖特性、以侧群(side population, SP)的分选方法和CD133免疫荧光染色探讨肿瘤细胞系中潜在的肿瘤干细胞,并以在SCID小鼠或者裸鼠体内验证各种细胞成瘤能力验证是否具有肿瘤干细胞特性。结果发现从SCID22-3B-1和XWLC-05中分离出0.3%和2%左右的肿瘤干细胞样细胞,且只有XWLC-05中的侧群细胞在裸鼠体内具有高度的致瘤性,2000个细胞便可致瘤,而该种细胞系则至少需要1×105个细胞可致瘤,并都可继代致瘤。在U-2OS、Saos-2和SCID22-3B-1中未检测到CD133阳性细胞。从肺癌细胞系及其侧群细胞中分离的单克隆细胞株,都含有侧群细胞,都具有较强的致瘤性,并都出现了分化现象;使用低粘附的培养方法,未发现侧群细胞含量明显的增加。在软琼脂试验中,U-2OS、Saos-2和SCID22-3B-1三种细胞系无法成细胞球,而XWLC-05可以成球团生长,其成球团能力与是否具有成瘤性侧群细胞有关。本研究发现U-2OS、Saos-2(?)(?)SCID22-3B-1三种端粒酶阴性肿瘤细胞系可能不存在肿瘤干细胞;其次XWLC-05具有较强的成瘤性,可以分离获得强致瘤性的肿瘤干细胞。
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